1.一种基于免疫痕迹法检测古代泥化丝织品的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）荧光碳点的制备：将果糖溶解于去离子水和无水乙醇的混合溶剂中，于水热反应釜内反应，制得荧光碳点溶液，之后经透析纯化、冷冻干燥，得到荧光碳点粉末；

2）荧光碳点标记蚕丝丝素蛋白二抗的制备：采用碳化二亚胺介导法偶联荧光碳点和蚕丝丝素蛋白二抗，制得荧光碳点标记蚕丝二抗；

3）称取现代蚕丝作为对照样品，以1:95-105的浴比在含有0.4-0.6wt% Na2PO4和0.8-

1.2wt%C17H35COONa的混合溶液中煮沸25-35min，进行脱胶处理，共脱胶两次；脱胶之后，将蚕丝用去离子水搓洗4次以上，放入烘箱干燥，得到现代蚕丝丝素纤维；然后将现代蚕丝丝素纤维以1:45-55的浴比浸入[AMIM]Cl离子液体中，加热反应，冷却；加入PM13-碱性蛋白酶粉末恒温孵育5-7h，进行灭酶，得到丝素蛋白/离子液体溶液A；

4）称取带有古代泥化丝织品的土样，用研钵研磨后，按固液比25-35g/60mL 加入到[AMIM]Cl离子液体中，加热反应，冷却；加入PM13-碱性蛋白酶粉末恒温孵育5-7h，进行灭酶，得到离子液体悬浮液；将悬浮液高速冷冻离心，取上层清液得到蛋丝素白/离子液体溶液B；

5）分别向丝素白/离子液体溶液A、B中加入无水乙醇，反复浸泡，使蛋白析出，滤出蛋白后，加入去离子水溶解，得到纯净的丝素蛋白提取液A、B；

6）将丝素蛋白提取液A、B分别在1-5℃条件下用透析袋透析40-50h，除去小分子杂质；

真空浓缩至终体积约为150-250μL，分别得到丝素蛋白浓缩液A、B；

7）SDS-PAGE凝胶电泳：分别量取40-60μL丝素蛋白浓缩液A、B，用CB 9.6缓冲液稀释至

4-6mL，在98-102℃条件下加热4-6min，进行变性处理；冷却后至室温后，将两种样品和蛋白质Marker加入制备好的免染胶加样孔中，在电解槽中加满电解液，电泳完成后，可在成像系统中观察电泳图像；

8）电转移：将电泳后的胶平铺在经甲醇和电转缓冲液处理过的PVDF膜上，夹在滤纸和海绵中间组装成转运夹层，放入湿式转膜装置中，恒流转膜；

9）膜成像：电转移完成后，取出PVDF膜，放入凝胶成像系统中成像，观察蛋白条带转移情况；

10）封闭：取出PVDF膜，用10-20mL的TBS液洗膜4-6min，用封闭液在室温条件下处理50-

70min；

11）免疫处理：用抗体稀释液以950-1050:1的体积比稀释一抗，将膜浸没在一抗稀释液中，室温条件下摇床孵育1 2 h；取出膜后用TBST液洗膜，之后浸入8-12mL稀释的荧光碳点~标记的二抗液中室温条件下孵育1-2 h；

12）发光显色：直接将免疫处理后的膜在凝胶成像系统中成像，利用荧光碳点在紫外光照射下发射荧光的性能，得到免疫印迹图像；如果两样品都得荧光条带，说明古代泥化丝织品属于蚕丝；如果只有现代蚕丝具有荧光条带，说明古代泥化丝织品不属于蚕丝。

2.如权利要求1所述的一种基于免疫痕迹法检测古代泥化丝织品的方法，其特征在于，步骤1）中，荧光碳点的制备方法具体为：将8-12mL去离子水和8-12mL无水乙醇混合，加入

0.35-0.45g果糖，搅拌至完全溶解；将混合溶液倒入水热反应釜中密封，置于155-165℃烘箱中加热2 3 h，待溶液变为浅黄色，反应完成，自然冷却至室温，得到荧光碳点溶液；将得~到的溶液用截留分子量为1000的透析袋透析20-28 h以除去其他小分子杂质；最后对纯化的碳点溶液进行冷冻干燥，可得到荧光碳点粉末。

3.如权利要求1所述的一种基于免疫痕迹法检测古代泥化丝织品的方法，其特征在于，步骤2）中，荧光碳点标记蚕丝二抗的制备方法具体如下：将荧光碳点、碳化二亚胺和二抗加入到9-11mmol/L的PBS缓冲液中，在室温条件下搅拌2 3 h后，用PBS缓冲液对溶液进行多次~洗涤离心，得到荧光碳点标记的蚕丝丝素蛋白二抗。

4.如权利要求1所述的一种基于免疫痕迹法检测古代泥化丝织品的方法，其特征在于，步骤3）、步骤4）中，所述PM13-碱性蛋白酶的制备：向95-105mL的0.1M的硼酸钠缓冲溶液中加入0.10-0.20g碱性蛋白酶和3.5-4.0g的MW15000的梳状PEG，在1-5℃条件下缓慢搅拌0.5-

1.5h，在外加45-55mL 1mmol/L HCl的条件下超滤除去未反应的PM13，重复三次，将滤液进行冷冻干燥，得到PM13-碱性蛋白酶粉末。

5.如权利要求1所述的一种基于免疫痕迹法检测古代泥化丝织品的方法，其特征在于，步骤6）中，透析袋的截留分子量为1000。

6.如权利要求1所述的一种基于免疫痕迹法检测古代泥化丝织品的方法，其特征在于，步骤7）中，电泳具体操作为：先恒压80V，8-12min后蛋白进入分离胶，调整恒定电压为120V，

15-25min后电泳完成，取出凝胶，观察电泳图像。

7.如权利要求1所述的一种基于免疫痕迹法检测古代泥化丝织品的方法，其特征在于，步骤8）中，电转移操作中，使用的PVDF膜先用甲醇浸泡50-70s，再用电转缓冲液浸泡；所用的滤纸、海绵需要用电转缓冲液浸润，按照海绵—滤纸—电泳凝胶—PVDF膜—滤纸—海绵的顺序组装转运夹层，恒流转膜是在100mA恒流下转膜1 2 h；本操作采用湿法转膜，转移过~程中放热，需将转膜装置放在冰浴中。

8.如权利要求1所述的一种基于免疫痕迹法检测古代泥化丝织品的方法，其特征在于，步骤10）中，孵育一抗和二抗后，室温下在摇床上用TBST液洗膜三次，每次4-6min。

9.如权利要求1或8所述的一种基于免疫痕迹法检测古代泥化丝织品的方法，其特征在于，步骤10）中，所述封闭液为5wt%脱脂奶粉。

10.如权利要求1所述的一种基于免疫痕迹法检测古代泥化丝织品的方法，其特征在于，步骤11）中，所述抗体稀释液为TBST液。