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专利号: 2017106499394
申请人: 安徽工程大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2023-07-19
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种两亲性多肽DGRGGGAAAA的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:

1)在溶剂的存在下,将树脂与Fmoc-Asp(Otbu)-OH(芴甲氧羰基-天冬氨酸-4-叔丁脂)、DIEA(N,N-二异丙基乙胺)进行接触反应,然后进行洗涤;

2)在反应体系中进行封头处理,接着加入哌啶进行脱保护,然后洗涤直至反应体系经过茚三酮检测为蓝色;

3)在溶剂的存在下,将G(甘氨酸)、HoBt(1-羟基苯并三氮唑)、DIC(N,N-二异丙基碳二亚胺)加入反应体系中进行接触反应,然后洗涤直至反应体系经过茚三酮检测为蓝色;

4)将R(精氨酸)、G(甘氨酸)、A(丙氨酸)依次加入反应体系中进行接触反应,接着加入哌啶进行进行脱保护,最后洗涤直至反应体系经过茚三酮检测为蓝色;

5)将反应产物进行洗涤、干燥,然后加入切割液切割、沉降、纯化以制得所述两亲性链状多肽DGRGGGAAAA;

其中,所述树脂选自2-cl树脂和Wang树脂中的至少一者。

2.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤1)中,相对于1g所述树脂,所述Fmoc-Asp(Otbu)-OH的用量为0.2-0.4g,溶剂DCM的用量为20-30mL,所述DIEA的用量为1-1.5mL。

3.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤1)中,所述接触反应至少满足以下条件:反应温度为20-25℃,反应时间为1.5-2.5h。

4.根据权利要求1所述的制备方法,其中,步骤1)的添料顺序为:先将树脂置于溶剂中浸泡,然后再添加DIEA与Fmoc-Asp(Otbu)-OH。

5.根据权利要求4所述的制备方法,其中,所述浸泡至少满足以下条件:浸泡温度为20-

25℃,浸泡时间为2-5min。

6.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤1)中,所述溶剂选自DCM(二氯甲烷)、三氯甲烷、四氢呋喃(THF)中的至少一者。

7.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤2)中,所述封头处理至少满足以下条件:处理温度为20-25℃,处理时间为30-60min。

8.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤2)中,所述脱保护至少满足以下条件:温度为20-25℃,时间为15-30min。

9.根据权利要求1所述的制备方法,其中,所述封头处理通过向反应体系中添加封头试剂而进行,并且所述封头试剂由DCM、甲醇和DIEA组成。

10.根据权利要求9所述的制备方法,其中,在步骤2)中,相对于1g的所述树脂,所述DCM的用量为20-30mL,所述甲醇的用量为1-1.5mL,所述DIEA的用量为1-1.5mL,所述哌啶的用量为15-20mL。

11.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤3)中,相对于1g的所述树脂,所述G的用量为0.4-0.6g,所述HoBt的用量为0.5-0.6g,所述DIC的用量为1-1.5mL。

12.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤3)中,所述接触反应至少满足以下条件:反应温度为20-25℃,反应时间为1-1.5h。

13.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤3)中,所述溶剂选自DCM(二氯甲烷)、三氯甲烷、四氢呋喃(THF)中的至少一者。

14.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤4)中,相对于1g的所述树脂,所述R的用量为0.9-1.5g,所述G的用量为0.4-0.6g,所述A的用量为0.5-1.0g。

15.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤4),所述接触反应至少满足以下条件:反应温度为20-25℃,各个氨基酸参与的接触反应的时间为45-60min。

16.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤4)中,所述脱保护至少满足以下条件:温度为20-25℃,时间为15-30min。

17.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤4)中,相对于1g的所述树脂,所述哌啶的用量为15-20mL。

18.根据权利要求1所述的制备方法,其中,所述切割液由TFA(三氟乙酸)和水组成。

19.根据权利要求18所述的制备方法,其中,所述TFA和水的体积比为(95-97):(3-5)。

20.根据权利要求1所述的制备方法,其中,相对于1g的所述树脂,所述切割液的用量为

5-15mL。

21.根据权利要求1所述的制备方法,其中,所述切割至少满足以下条件:切割温度为

20-25℃,切割时间为2-2.5h。

22.根据权利要求1所述的制备方法,其中,在步骤5)中,所述洗涤依次通过DMF、DCM、甲醇洗涤,并且,相对于1g的所述树脂,所述DMF、DCM、甲醇的用量各自独立地为15-20mL。

23.一种两亲性多肽DGRGGGAAAA,其特征在于,所述两亲性多肽DGRGGGAAAA通过权利要求1-22中任意一项所述的的制备方法制备而得。

24.一种抗癌药物传递系统的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:

1)将三乙胺和盐酸阿霉素(DOX·HCL)在有机溶剂中进行避光反应,然后向体系中加入水且进行共沸蒸馏制得乳状DOX,最后冷冻干燥以制得疏水性阿霉素;

2)将所述疏水性阿霉素溶于水,再将加入两亲性多肽DGRGGGAAAA、甲酸进行接触反应,然后将体系进行透析,最后将透析后的体系进行离心处理取上清液以得到抗癌药物传递系统,即DGRGGGAAAA/DOX两亲性聚合胶束溶液;

其中,所述两亲性多肽DGRGGGAAAA为权利要求23所述的两亲性多肽DGRGGGAAAA。

25.根据权利要求24所述的制备方法,其中,在步骤1)中,相对于20mg的所述DOX·HCL,所述三乙胺的用量为2-3mL,所述有机溶剂的用量为5-10mL。

26.根据权利要求24所述的制备方法,其中,在步骤1)中,所述避光反应至少满足以下条件:反应温度为20-30℃,反应时间为4-6h。

27.根据权利要求24所述的制备方法,其中,在步骤1)中,所述共沸蒸馏的具体操作为:将体系和水以1-3:1的体积比混合,然后在20-25℃下旋蒸蒸馏30-60min。

28.根据权利要求24所述的制备方法,其中,在步骤1)中,所述冷冻干燥至少满足以下条件:温度为-80℃以下,压力为1000Pa以下,干燥时间为12-24h。

29.根据权利要求24所述的制备方法,其中,所述有机溶剂选自DMF、DCM和DMSO中的至少一者。

30.根据权利要求24所述的制备方法,其中,在步骤2)中,相对于2-5mg的所述疏水性阿霉素,所述两亲性多肽DGRGGGAAAA的用量20-50mg,所述水的用量6-10mL,所述的甲酸的用量为2-5mL。

31.根据权利要求24所述的制备方法,其中,所述甲酸的浓度为88-98mg/mL,所述两亲性多肽DGRGGGAAAA的纯度为96-98重量%。

32.根据权利要求24所述的制备方法,其中,在步骤2)中,所述接触反应至少满足以下条件:反应温度为15-35℃,反应时间为24-36h。

33.根据权利要求24所述的制备方法,其中,所述透析采用的透析袋的截留分子量为

500-1000Da。

34.一种抗癌药物传递系统,其特征在于,所述抗癌药物传递系统通过权利要求24-33中任意一项所述的制备方法制备而得。