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专利号: 201710650829X
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2023-08-24
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种荧光纳米探针,其特征在于,所述荧光纳米探针由化合物(I)在水中自组装而制得:所述化合物(I)结构式为:

2.一种如权利要求1所述的荧光纳米探针的制备方法,其特征在于所述制备方法为:对羟基苯甲醛与3-溴丙炔在碱性条件下发生亲核取代反应,生成化合物(II);化合物(II)与氨甲醇溶液生成席夫碱化合物,随后与丙烯基硼酸邻二叔醇酯发生取代反应生成化合物(III);化合物(III)与化合物(IV)在酸性条件下,生成席夫碱中间产物,其碳氮双键被还原剂三乙酰氧基硼氢化钠还原生成化合物(V);化合物(VI)与3-叠氮丙胺发生酰胺反应生成化合物(VII);最后,将化合物(V)与化合物(VII)在一价铜的催化下,生成化合物(I);

再将化合物(I)溶于DMSO作为母液,用超纯水或PBS缓冲液或细胞培养液稀释,超声数分钟,然后剧烈震荡,化合物(I)自组装得到所述荧光纳米探针;

3.如权利要求2所述的荧光纳米探针的制备方法,其特征在于所述制备方法具体为:(1)对羟基苯甲醛与3-溴丙炔按物质的量比1:2在碱性条件下反应,经后处理A制备得化合物(II);反应温度为60-70℃,反应时间为3小时,反应溶剂为丙酮;

(2)化合物(II)与氨甲醇溶液、丙烯基硼酸邻二叔醇酯在0℃下混合后转至25-35℃反应,经后处理B制备得化合物(III);反应时间为12小时,反应溶剂为甲醇;所述化合物(II)与氨甲醇溶液中的氨、丙烯基硼酸邻二叔醇酯的物质的量比为1:10:1.5;

(3)化合物(IV)与化合物(III)、三乙酰氧基硼氢化钠按理论物质的量比1:1.2:4在酸性条件下0℃混合后转至20-30℃反应,经后处理C制备得化合物(V);反应时间为12小时,反应溶剂为四氢呋喃;

(4)化合物(VI)与3-叠氮丙胺按物质的量比1:1.2反应,经后处理D制备得化合物(VII);反应温度为室温,反应时间为10小时,反应溶剂为二氯甲烷;

(5)将化合物(V)与化合物(VII)按理论物质的量比1:1在一价铜催化下反应,蒸干溶剂,粗产物利用高效液相色谱纯化得到化合物(I);反应温度为室温,反应时间为6小时,反应溶剂为四氢呋喃和水;

(6)将化合物(I)溶于DMSO配制成浓度为0.1~2mM的探针母液,用超纯水或PBS缓冲液或DMEM培养基稀释成原来母液体积的99倍,超声数分钟,然后剧烈震荡,化合物(I)自组装得到所述荧光纳米探针。

4.如权利要求3所述的荧光纳米探针的制备方法,其特征在于:步骤(1)中所述碱性条件采用碳酸钾实现。

5.如权利要求3所述的荧光纳米探针的制备方法,其特征在于:步骤(3)中所述酸性条件采用乙酸实现。

6.如权利要求3所述的荧光纳米探针的制备方法,其特征在于:

所述后处理A为:反应液减压旋蒸除去溶剂后加入水,乙酸乙酯萃取,合并有机相,取有机相用水以及饱和食盐水洗涤数次,无水硫酸钠干燥,过滤,旋干溶剂,经柱层析分离后得到目标产物,洗脱剂为体积比1:10的乙酸乙酯和石油醚;

所述后处理B为:反应液减压旋蒸除去溶剂,粗产物进行层析柱分离后得到目标产物,洗脱剂为体积比40:1的二氯甲烷和甲醇;

所述后处理C为:反应液减压旋蒸除去溶剂,粗产物进行层析柱分离后得到目标产物,洗脱剂为体积比20:1的二氯甲烷和甲醇;

所述后处理D为:反应液采用薄层层析进行分离,展开剂为体积比20:1的二氯甲烷和甲醇,得到目标化合物。

7.一种权利要求1所述的荧光纳米探针在检测甲醛浓度中的应用。

8.如权利要求7所述的应用,其特征在于:所述甲醛以水溶液形式存在,浓度为0~

5mmol/L。

9.如权利要求8所述的应用,其特征在于:所述甲醛为细胞内甲醛,浓度为0~1mmol/L。

10.如权利要求9所述的应用,其特征在于:所述细胞为人乳腺癌细胞MCF-7。