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专利号: 2017107284614
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种提高谷胱甘肽产量的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)将保藏编号为CCTCC No:M 2016664的巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)JQ在种子培养基中培养至OD600达到1.0-40.0,得到活化后的种子液,其中培养过程中所述种子培养基的pH为5.5-6.5;

(2)将步骤(1)得到的所述活化后的种子液按1-15%接种量接种至发酵培养基中进行发酵培养,其中所述发酵培养基的初始pH值为5.5-6.0,发酵培养温度为25-35℃;

(3)当发酵培养至OD600达到40-80时,开始补加葡萄糖;其中,基于残糖量补加所述葡萄糖,使得发酵培养基中所述残糖量浓度为0.5-1.5g/L;

葡萄糖的补加方式为恒速流加,恒速流加时,按1.0-50g/(L·h)的流速恒速补加所述葡萄糖;或葡萄糖的补加方式为指数流加,指数流加时,按菌体比生长速率为0.05-0.3指数补加所述葡萄糖;或葡萄糖的补加方式为指数流加与恒速流加的混合方式,首先按菌体比生长速率为

0.05-0.3指数补加所述葡萄糖,待流速达到10-20mL/h时,改为恒速流加;

(4)继续发酵培养,当OD600达到100-300时,补加氨基酸或其盐,其中氨基酸在发酵培养基中的终浓度为1-50mmol/L;氨基酸为谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸;所述谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸的摩尔比为0.1-1.0:0.1-1.0:0.1-1.0。

2.根据权利要求1所述的提高谷胱甘肽产量的方法,其特征在于,在步骤(1)之前,还包括以下步骤:将巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)JQ菌液接种至斜面培养基,在25-35℃下培养12-

36h,得到高活性菌种。

3.根据权利要求1所述的提高谷胱甘肽产量的方法,其特征在于:在步骤(1)中,所述种子培养基包括以下含量的各组分:葡萄糖5-50g/L,酵母提取物1-25g/L,蛋白胨5-50g/L。

4.根据权利要求1所述的提高谷胱甘肽产量的方法,其特征在于:在步骤(2)中,所述发酵培养基包括以下含量的各组分:葡萄糖10-150g/L,酵母提取物1-15g/L,硫酸铵1-30g/L,K2HPO4·3H2O 1-10g/L,镁盐0.1-100mmol/L,钙盐0.1-10.0mmol/L,钾盐1-20.0mmol/L。

5.根据权利要求1所述的提高谷胱甘肽产量的方法,其特征在于:在步骤(3)中,当溶氧水平为10-60时,开始补加所述葡萄糖。