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专利号: 2017107862807
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种不以疾病的诊断或治疗为目的的中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E检测方法,其特征在于,所述检测方法包括以下步骤:(1)由内含荧光分子的中空介孔二氧化硅连接抗免疫球蛋白E抗体作为荧光探针;

(2)由二氧化硅包覆四氧化三铁制备所得的Fe3O4@SiO2连接过敏原作为磁性探针;

(3)将步骤(1)的荧光探针和步骤(2)的磁性探针同时加入含有中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E的离体血清中;

(4)孵育,磁分离去上清,采用缓冲液冲洗后加入碱液,然后超声释放荧光分子,检测荧光强度;

(5)构建中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E浓度与荧光强度的回归方程;

(6)将待检测离体血清采用相同的方法检测荧光强度,带入步骤(5)中的回归方程,计算待检测离体血清中特异性免疫球蛋白E浓度。

2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述荧光探针为粒径为195-205nm,内径为

120-130nm。

3.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述磁性探针的粒径为100-120nm。

4.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述方法中离体血清溶液pH 11,孵育时间为

60min,孵育温度为37℃。

5.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述方法具体是采用粒径为195-205nm,内径为120-130nm的荧光探针作为抗免疫球蛋白E抗体的载体,粒径为100-120nm的磁性探针Fe3O4@SiO2作为过敏原载体,两种材料同时捕获靶标中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E,检测荧光强度,带入构建的回归方程计算待测离体血清中特异性免疫球蛋白E浓度;所述方法的回归方程为:y=2090-11690x,R2=0.9986,IgE最低检测限为0.0176ng/mL。

6.根据权利要求5所述方法,其特征在于,所述过敏原为血蓝蛋白。

7.一种检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括荧光探针和磁性探针;所述荧光探针由内含荧光分子的中空介孔二氧化硅连接抗免疫球蛋白E抗体得到的;所述磁性探针由二氧化硅包覆四氧化三铁所得的Fe3O4@SiO2连接过敏原得到的。

8.根据权利要求7所述试剂盒,其特征在于,所述过敏原为血蓝蛋白。

9.根据权利要求7所述试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的检测回归方程为:y=2090-

11690x,R2=0.9986,IgE最低检测限为0.0176ng/mL。