1.一种矮牡丹2n花粉的诱导方法,其特征在于,包括下述步骤:
1)花蕾选择:开花前15~25d,选择10~20年生健壮矮牡丹植株上处于露红期的花蕾,所述花蕾直径为3~5cm;所述花蕾内花粉母细胞处于减数分裂的粗线期至中期Ⅰ;
2)花蕾的预处理:晴天上午7~8点,用沾有75%酒精的脱脂棉消毒步骤1)所选花蕾顶部20~30s;
3)2n花粉的诱导:采用1ml医用注射器,将加倍药剂溶液从花蕾顶部注射至步骤2)消毒过的花蕾内部,连续三天,每天注射一次,注射器每次拔出后,对针孔封口;所述加倍药剂溶液为:5~7g/L二甲基亚砜+20~30g/L秋水仙素;
4)花粉的采集和观测:在蕾开期,采集经步骤1)~步骤3)处理过的矮牡丹花蕾,带回实验室后剥去花瓣,用解剖针快速剥取其中的成熟花粉,置于载玻片上,滴加0.5%醋酸洋红染色液,盖上盖玻片,室温条件下遮光放置15~20分钟后,镜检2n花粉比例。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3)中,所述加倍药剂溶液采用0.22μm的微孔滤膜过滤灭菌,所述注射量为1.5~2ml。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3)中,所述注射部位为花蕾顶端;所述针孔封口采用石蜡。