1.sPD1蛋白和/或sPD1基因作为免疫佐剂在制备重组HPV疫苗中的应用;其中,所述sPD1蛋白含有如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列,或如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的氨基酸序列;
所述sPD1基因含有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,或如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的核苷酸序列。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述重组HPV疫苗包括重组DNA疫苗、重组RNA疫苗、重组蛋白疫苗中的至少一种。
3.一种重组蛋白疫苗,其特征在于,包括PD1蛋白和mE6E7蛋白,所述sPD1蛋白含有如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列,或如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的氨基酸序列;
所述mE6E7蛋白含有如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列,或如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的氨基酸序列。
4.一种重组DNA疫苗,其特征在于,包括sPD1基因和mE6E7基因,所述sPD1基因含有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,或如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的核苷酸序列;
所述mE6E7基因含有如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列,或如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的核苷酸序列。
5.一种重组RNA疫苗,其特征在于,所述重组RNA疫苗翻译权利要求3所述的重组蛋白疫苗中的sPD1蛋白和mE6E7蛋白。
6.一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒载体含有pcDNA3.1(+)质粒序列和权利要求4所述的重组DNA疫苗中的sPD1基因序列和mE6E7基因序列。
7.一种基因工程化宿主细胞,其特征在于,所述基因工程化宿主细胞包含有如权利要求6所述的重组质粒。
8.一种重组蛋白疫苗的制备方法,其特征在于,包括由权利要求6所述的重组质粒转染宿主细胞表达步骤。
9.一种重组RNA疫苗的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:提供权利要求6所述的重组质粒;
将所述重组质粒在体外转录成RNA。
10.如权利要求9所述的重组RNA疫苗的制备方法,其特征在于,所述重组质粒的制备过程为:人工合成sPD1基因序列以及mE6E7基因序列,并与pcDNA3.1(+)质粒连接;
将连接后的产物转染宿主细胞进行培养,获得阳性克隆重组表达载体。