1.一种微卫星遗传标记监测曼氏无针乌贼缩短种质监测周期的方法,包括DNA的提取,引物的设计,PCR扩增,种质监测,其特征在于:所述DNA的提取过程为:提取曼氏无针乌贼基因组DNA,用限制酶Mbol将基因组DNA酶切,回收400‑1000bp DNA片段,用分光光度计测定DNA样品的纯度和浓度,用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段的大小;
所述引物设计过程为:利用序列分别为SEQ ID No:20和SEQ ID No:19的接头与曼氏无针乌贼基因组DNA酶切片段连接作为连接产物,并经PCR扩增、链霉素磁珠捕捉、洗脱片段的扩增获得微卫星序列SEQ ID No:1‑19,根据微卫星序列SEQ ID No:1‑19两端的侧翼序列设计引物,所述引物设计条件为:GC含量为40%‑60%,退火温度为48‑60℃,引物长度为18bp‑
24bp;
所述PCR扩增过程为:将5μL 10×buffer、4μL dNTP、2U Taq聚合酶、2μL上游引物、2 μL下游引物、2μL模板DNA混合,加灭菌水至终体积50μL,再加入0.1μL二苯溴甲烷及0.1μL3‑甲基二苯甲酮;将混合物在95℃预变性5min,然后 是35个循环,每个循环包括94℃变性45s,
57℃退火45s,72℃延伸1min,循环完成后再置于72℃延伸10min;
所述种质监测过程为:将PCR扩增产物转到聚丙烯酰胺变性凝胶上电泳分型,经硝酸银染色后进行拍照,并利用软件Gel‑Pro Analyzer`4.5获取每条乌贼的基因型数据,利用 PopGen32软件统计各个微卫星标记基因座的等位基因频率、等位基因数、有效等位 基因数、观测杂合度、期望杂合度、哈德温伯格平衡,计算出多态性信息含量。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述酶切温度为37℃,酶切时间为3h。