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专利号: 2017110672954
申请人: 广西医科大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1. 一种干细胞样记忆性T细胞体外诱导剂,其特征在于,所述的诱导剂包括红桂木凝集素;所述的诱导剂还包括细胞因子IL-2;所述的干细胞样记忆性T细胞为 CD3+CD45RA+ CD45RO-CD62L+CCR7+CD95+CD122+细胞亚群;其中,所述的红桂木凝集素的浓度为2.5   10µ~g/ml,所述的细胞因子IL-2的浓度为5   25 ng/ml。

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2.一种干细胞样记忆性T细胞体外诱导方法,其特征在于,具体步骤为:(1)将分选获得的CD3+细胞置于添加有流式细胞术用抗体的细胞培养液中培养;所述的流式细胞术用抗体包括human CD3-APC、FITC、human CD8-APC、human CD8-Pacific blue、human CD45RA-PE、human CD45RO-PE-Cy5、human CD62L-PE-Cy7、human CCR7-FITC、human CD95-PE-Cy5和human CD122-PE的一种或多种;

(2)在培养液中加入诱导剂红桂木凝集素和细胞因子IL-2进行诱导培养;所述的红桂木凝集素的浓度为2.5   10µg/ml,所述的细胞因子IL-2的浓度为5   25 ng/ml;

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+ + + 

(3)诱导培养完成后,分选出CD3 TSCM细胞;分选方法为在CD3 细胞中选定CD45RACD45RO-的细胞亚群,进一步再选出CD62L+ CCR7+的细胞亚群,随后在这个亚群细胞的基础上,选定CD95+ CD122+双阳性细胞。

3.根据权利要求2所述的干细胞样记忆性T细胞体外诱导方法,其特征在于,所述的红桂木凝集素的浓度为7.5µg/ml,所述的细胞因子IL-2的浓度为12.5ng/ml。

4.根据权利要求2所述的干细胞样记忆性T细胞体外诱导方法,其特征在于,所述的TSCM细胞培养时间在6   8天。

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5.一种红桂木凝集素在制备干细胞样记忆性T细胞体外诱导剂的应用,其特征在于,所述的干细胞样记忆性T细胞为CD3+CD45RA+CD45RO-CD62L+CCR7+CD95+CD122+细胞亚群;所述的红桂木凝集素的浓度为2.5   10µg/ml。

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6.一种红桂木凝集素和细胞因子IL-2的组合在制备干细胞样记忆性T细胞体外诱导剂的应用,其特征在于,所述的干细胞记忆性T细胞为CD3+CD45RA+CD45RO-CD62L+CCR7+CD95+CD122+细胞亚群;所述的红桂木凝集素的浓度为2.5   10µg/ml,所述的细胞因子IL-2的浓~度为5   25 ng/ml。

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