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专利号: 2017111556927
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇的生物催化制备方法,其特征在于所述方法为:

以白地霉(Geotrichum candidum)ZJPH1704经发酵培养获得的湿菌体为生物催化剂,以2-三氟甲基苯乙酮为底物,以甘油为辅助底物,在pH 5.8~8.0的磷酸缓冲液中,于25~40℃、

200rpm条件下进行生物还原反应,反应结束后,将反应液分离纯化,获得(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇;所述白地霉(Geotrichum candidum)ZJPH1704,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号:CCTCC NO:M 2017380,保藏日期为:2017年6月26日,保藏地址为中国武汉,武汉大学,邮编430072。

2.如权利要求1所述(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇的生物催化制备方法,其特征在于所述底物用量以缓冲液体积计为5~25mmol/L,湿菌体用量以缓冲液体积计为100~500g/L;辅助底物用量以缓冲液体积计分别为20g/L、40g/L、70g/L、100g/L、150g/L或200g/L。

3.如权利要求1所述(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇的生物催化制备方法,其特征在于所述生物催化剂按如下方法制备:(1)斜面培养:将白地霉ZJPH1704接种至斜面培养基,25~30℃培养1-2天,获得斜面菌种;斜面培养基终浓度组成为:葡萄糖15g/L,蛋白胨5g/L,酵母膏5g/L,K2HPO4 0.5g/L,KH2PO4 0.5g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,NaCl 1g/L,(NH4)2SO4 1g/L,琼脂20g/L,溶剂为蒸馏水,pH 7.0;

(2)种子培养:将斜面菌种接种至种子培养基中,25~30℃、150~250rpm培养10~24h,获得种子液;种子培养基终浓度组成为:葡萄糖15g/L,蛋白胨5g/L,酵母膏5g/L,K2HPO4 

0.5g/L,KH2PO4 0.5g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,NaCl 1g/L,(NH4)2SO4 1g/L,溶剂为蒸馏水,pH 7.0;

(3)发酵培养:将种子液以体积浓度为4~10%的接种量接种至发酵培养基中,装液量为100mL/250mL摇瓶,25~30℃、150~250rpm培养24~28h,发酵结束后,将发酵液离心,收集湿菌体,即为生物催化剂;所述发酵培养基终浓度组成为:葡萄糖15g/L,蛋白胨5g/L,酵母膏5g/L,KH2PO4 0.5g/L,(NH4)2SO4 1g/L,K2HPO4 0.5g/L,NaCl 1g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,溶剂为蒸馏水,pH 7.0。