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专利号: 2017111784529
申请人: 青岛农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-11-29
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种防治苹果果实轮纹病的季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)Y-1,于

2015年12月31日保藏于:中国典型培养物保藏中心,保藏号:CCTCC NO:M2015814。

2.一种利用权利要求1所述的季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)Y-1制备的生防菌剂。

3.根据权利要求2所述的生防菌剂,其特征在于用于防治葡萄病害。

4.根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于:所述的季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)Y-1用于增强植物体内防御酶的活性,所述的防御酶为CAT、PPO、SOD和POD。

5.根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于:使用时将季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)Y-1制备成菌悬液。

6.根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于:所述季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)Y-1菌悬液通过喷施或浸润的方式施用于葡萄。

7.根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于:所述季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)Y-1菌悬液浓度为103~108cfu·mL-1,最优浓度为107cfu·mL-1。

8.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述葡萄病害为由病原真菌引起的苹果白腐病、灰霉病、青霉病、褐腐病和炭疽病。

9.根据权利要求3和8所述的应用,其特征在于:所述葡萄白腐病病原菌为白腐垫壳孢(Coniella diplodiella)、灰霉病病原菌灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、青霉病病原菌青霉菌(Penicillium spp)、褐腐病病原菌链核盘菌(Monilinia spp)和炭疽病病原菌为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)。

10.根据权利要求2所述的生防菌剂,其特征在于所述生防菌剂的制备方法如下:

1)培养基的制备:

酵母浸出粉胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基:酵母提取物(Yeast Extract)10g,蛋白胨(Peptone)20g,溶解于900mL水中,加入20g琼脂粉,121℃高压蒸汽灭菌20min后,加入100mL已灭菌的20%葡萄糖溶液;

酵母浸出粉胨葡萄糖(YPD)液体培养基:酵母提取物10g,蛋白胨20g,溶解于900mL水中,121℃高压蒸汽灭菌20min后,加入100mL已灭菌的20%葡萄糖溶液。分装于250mL三角瓶中,装液量为80mL;

2)季也蒙毕赤酵母Y-1菌株的活化:将菌株按无菌操作要求划线接种于YPD琼脂培养基中,30℃恒温培养2-3d;

3)季也蒙毕赤酵母Y-1菌株的液体培养:挑取步骤2)中活化的Y-1菌株的单菌落,接种于瓶装量为80mL/250mL的YPD液体培养基中,150r·min-1,30℃恒温震荡培养24h,得到菌株Y-1发酵种子液。将所述发酵种子液按1:100的接种量接种到所述的YPD液体培养基中,30℃恒温震荡培养48h,得到浓度为107cfu·mL-1的季也蒙毕赤酵母Y-1菌株的细胞培养液;

4)季也蒙毕赤酵母Y-1生防制剂的制备:将步骤3)中制备的细胞培养液,在4℃条件下,

6000r·min-1离心10min,收集菌体沉淀用无菌水重新悬浮,得到108cfu·mL-1的菌悬液;

8 -1

5)稀释:将步骤4)中制备的10cfu·mL 的菌悬液稀释0-100倍;步骤3)中所述的细胞培养液和4)中所述的菌悬液均为生防制剂。