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专利号: 2017112835689
申请人: 商丘师范学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种基于金属有机框架材料作为信号探针的β-淀粉样蛋白寡聚体的核酸适配体电化学传感器,其特征在于,通过如下方法制备而成:

(1)金纳米粒子/Cu-MOFs复合物AuNPs/Cu-MOFs的制备:将均苯三甲酸在超声条件下溶解于甲醇中,并将CuSO4·3H2O溶解于H2O中,然后将CuSO4·3H2O溶液逐滴滴入上述均苯三甲酸溶液中,在室温下静置反应;反应结束后利用离心的方法将沉淀物反复洗涤,真空干燥过夜得到Cu-MOFs;将Cu-MOFs粉末加入到AuNPs溶液中在室温下连续搅拌反应,反应结束后,将沉淀反复洗涤,真空干燥得AuNPs/Cu-MOFs粉末;

(2)核酸适配体在AuNPs/Cu-MOFs上的固定:将AuNPs/Cu-MOFs粉末分散在磷酸盐缓冲溶液中,将硫醇化的核酸适配体粉末溶解于上述AuNPs/Cu-MOFs溶液中,并在室温下孵育过夜得到核酸适配体溶液;

(3)夹心型核酸适配体传感器的构筑:将玻碳电极打磨抛光,清洗,将电极表面吹干,将其放入HAuCl4水溶液中在恒电位下电沉积,得到金纳米花AuNFs修饰的玻碳电极;将AuNFs修饰的玻碳电极浸泡于硫醇化的核酸适配体溶液中室温孵育过夜;随后,用1-己硫醇溶液封闭电极表面,消除AuNFs的非特异性结合位点;然后将上述电极浸入不同浓度的Aβ寡聚体溶液中,在恒温水浴下使适配体与Aβ寡聚体进行特异性结合;再将电极浸泡于步骤(2)制得的核酸适配体修饰的AuNPs/Cu-MOFs溶液中进行孵育,使第二层核酸适配体与Aβ寡聚体进行特异性结合;用缓冲溶液洗涤后,制得夹心型核酸适配体电化学传感器;

所述硫醇化的核酸适配体的DNA序列为5′-HS-GCCTGTGGTGTTGGGGCGGGTGCG-3’。

2.根据权利要求1所述的基于金属有机框架材料作为信号探针的β-淀粉样蛋白寡聚体的核酸适配体电化学传感器,其特征在于,步骤(1)所述的进行AuNPs/Cu-MOFs复合物制备时,Cu-MOFs粉末和AuNPs溶液的比例为50mg:15mL。

3.根据权利要求1所述的基于金属有机框架材料作为信号探针的β-淀粉样蛋白寡聚体的核酸适配体电化学传感器,其特征在于,步骤(2)所述的核酸适配体溶液浓度为10μM。

4.根据权利要求1所述的基于金属有机框架材料作为信号探针的β-淀粉样蛋白寡聚体的核酸适配体电化学传感器,其特征在于,步骤(3)中核酸适配体修饰的电极与Aβ寡聚体的培养时间为3h;电极识别Aβ寡聚体后与核酸适配体修饰的AuNPs/Cu-MOFs的最佳培养时间为3h。