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专利号: 2018101099845
申请人: 青岛科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种β-葡萄糖苷酶的固定化方法,其特征在于:以Eudragit L-100为载体,固定化修饰β-葡萄糖苷酶,制备得到固定化β-葡萄糖苷酶;其中,所述修饰β-葡萄糖苷酶是以单甲氧基聚乙二醇丙醛(mPEG-ALD)为修饰剂,定点修饰β-葡萄糖苷酶制备而成的。

2.如权利要求1所述的固定化方法,其特征在于:所述固定化修饰β-葡萄糖苷酶的反应条件为,Eudragit L-100载体溶液的体积浓度为0.1~5.0%,修饰β-葡萄糖苷酶溶液的体积浓度为1~10mg/mL,V载体溶液:V酶液=1:1~6:1;固定化反应的pH值为7.0~13.0,反应温度为

15~50℃,反应时间为30~200min。

3.如权利要求2所述的固定化方法,其特征在于:所述固定化修饰β-葡萄糖苷酶的反应条件为,Eudragit L-100载体溶液的体积浓度为0.5~2.0%,修饰β-葡萄糖苷酶溶液的体积浓度为1~4mg/mL;固定化反应的pH值为9.0~12.0,反应温度为20~35℃,反应时间为30~100min。

4.如权利要求1所述的固定化方法,其特征在于:所述β-葡萄糖苷酶来源于苦杏仁。

5.如权利要求1所述的固定化方法,其特征在于:修饰剂单甲氧基聚乙二醇丙醛的分子量为5000。

6.如权利要求1所述的固定化方法,其特征在于:修饰β-葡萄糖苷酶的具体制备方法为,在35℃温度条件下,向pH为4.8的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液中加入β-葡萄糖苷酶粉,待酶粉溶解后加入相对分子量为5000的单甲氧基聚乙二醇丙醛,1h后加入氰基硼氢钠,反应

24h,加入甘氨酸终止反应,透析24h,即得到纯化的修饰β-葡萄糖苷酶溶液。