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专利号: 2018101365735
申请人: 赣南师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-11-06
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种近红外氧杂蒽类荧光染料在血吸虫成虫荧光标记中的应用,所述近红外氧杂蒽类荧光染料具有式I所示结构:

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:(1)将具有式I所示结构的近红外氧杂蒽类荧光染料、二甲基亚砜和磷酸缓冲液混合,得到荧光染料溶液;

(2)向所述步骤(1)中荧光染料溶液中加入血吸虫成虫,在15~35℃下孵育5min~6h,得到标记血吸虫成虫;

(3)在激发波长为635nm的条件下,将所述步骤(2)中标记血吸虫成虫的荧光标记情况进行检测,采集650~750nm的荧光信号进行荧光成像。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述磷酸缓冲液的pH值为7.0~7.4。

4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述荧光染料溶液的浓度为4~6μmol。

5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述步骤(1)具体为:将具有式I所示结构的近红外氧杂蒽类荧光染料与二甲基亚砜混合,得到母液;

将所述母液与磷酸缓冲液混合,得到荧光染料溶液。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述母液的浓度为0.9~1.1mmol。

7.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述步骤(2)中血吸虫成虫的获取方法,包括以下步骤:将感染血吸虫毛蚴的阳性钉螺放入清水中,在白炽灯下光照1.5~2.5h,逸出血吸虫尾蚴;

将六周龄雌性小鼠剪去腹部体毛,用水湿润所述小鼠的腹部皮肤,将含有45~55条所述血吸虫尾蚴的盖玻片贴于所述小鼠的腹部皮肤上,保持15~25min,使所述血吸虫尾蚴穿透所述小鼠的腹部皮肤进行感染,得到感染小鼠;

将所述感染小鼠饲养6~7周后,采取灌注法于所述感染小鼠的肝门-肠系膜静脉中收集血吸虫,将所述血吸虫在生理盐水中漂洗后在RPMI-1640细胞培养液中培养1.5~2.5h,得到血吸虫成虫。