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专利号: 2018102469110
申请人: 临沂大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种高灵敏度荧光定量检测血清肿瘤标志物的纳米复合探针,其特征在于,所述纳米复合探针包括金纳米粒子以及负载在所述金纳米粒子表面的待检测血清肿瘤标志物二抗和DNA酶链,所述DNA酶链的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;

所述DNA酶链能与荧光素和荧光猝灭剂修饰的具有发卡结构的底物链结合,在Zn2+催化下切断底物链使荧光素与荧光猝灭剂分离,产生荧光信号;

所述纳米复合探针的制备方法为:以金纳米粒子为载体,先将所述DNA酶链修饰在金纳米粒子表面,得到金纳米粒子-酶链;再将待检测血清肿瘤标志物二抗修饰在所述金纳米粒子-酶链上;

所述DNA酶链与金纳米粒子通过共价键连接;

所述DNA酶链、待检测血清肿瘤标志物二抗修饰的方法为不对称修饰。

2.根据权利要求1所述高灵敏度荧光定量检测血清肿瘤标志物的纳米复合探针,其特征在于,所述底物链的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种提高血清肿瘤标志物荧光定量检测方法灵敏度的组合物,包括以下试剂,底物溶液和权利要求1或2所述的纳米复合探针,所述底物溶液以PBS缓冲液为溶剂,包括荧光素和荧光猝灭剂修饰的发卡结构的底物链以及Zn2+,所述底物链的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.根据权利要求3提高血清肿瘤标志物荧光定量检测方法灵敏度的组合物,其特征在于,所述底物溶液含有0.2×10-7~2.0×10-7M的所述底物链和100~300μM的Zn2+。

5.一种用于检测血清肿瘤标志物的荧光定量试剂盒,其特征在于,包括权利要求3或4所述的组合物、包被有待测肿瘤标志物单克隆抗体的微孔板和待测肿瘤标志物的标准品。

6.根据权利要求5所述用于检测血清肿瘤标志物的荧光定量试剂盒,其特征在于,所述待检测的血清肿瘤标志物包括CA242、PSA、CEA、AFP、CA125、CA15-3、CA19-9、NSE、CA50、CA72-4、CYFRA21-1、TPA、SCCA、HE4和Ft中的一种。

7.根据权利要求5所述用于检测血清肿瘤标志物的荧光定量试剂盒,其特征在于,所述包被有待测肿瘤标志物单克隆抗体的微孔板中,待测肿瘤标志物单克隆抗体浓度为0.5~4μg/孔。