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专利号: 2018102584763
申请人: 阜阳师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-08-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种小鼠胚胎移植胶,其特征在于,是将孕马血清、绒毛膜促性腺激素、羊膜物质、小鼠血浆、链霉素添加于pH为7.0~7.2、浓度为20mmol/L的HEPES缓冲液中制备所得;

每mL的HEPES缓冲液中各物质的添加量如下:孕马血清0.01~0.05μg,绒毛膜促性腺激素100~375单位,链霉素30~50μg,羊膜物质20μL,小鼠血浆8~10μL;

所述小鼠胚胎移植胶是通过如下方法制备得到的:S1:羊膜物质的制备

以小鼠分娩后的羊膜为原料,经胰蛋白酶联合Triton X‑100的脱细胞处理后,得到脱细胞羊膜;在液氮冷冻条件下,将得到的脱细胞羊膜进行高速研磨,得到颗粒碎片,并对得5

到的颗粒碎片用钴60辐照消毒,得到粒状羊膜;按照每1mg粒状羊膜上接种1~1.5×10 个脐带间充质干细胞的比例,将脐带间充质干细胞接种于所述粒状羊膜上,联合培养5~8h,得到干细胞‑粒状羊膜混合物,混合物过120μm筛网后用生理盐水重悬得到所述羊膜物质;

S2:小鼠血浆的制备

取小鼠离体的新鲜血液样品,通过离心获得富含血小板的血浆,于4℃保存备用,5天内使用;

S3:按照比例分别取孕马血清、绒毛膜促性腺激素、羊膜物质、小鼠血浆、链霉素和pH为

7.0~7.2、浓度为20mmol/L的HEPES缓冲液,将各物质混合均匀,即得到所述小鼠胚胎移植胶。

2.根据权利要求1所述的小鼠胚胎移植胶,其特征在于,每1mg粒状羊膜上接种1~1.55

×10个脐带间充质干细胞。