1.多信号荧光探针同时区分检测Hcy、Cys和GSH,其特征在于,所述的荧光分子探针的化学结构通式如(1)所示:(1),其中,R = 氢/烷基/芳香基。
2.如权利要求1所述的多信号荧光探针的合成,其特征在于,所述荧光分子探针的制备方法包括以下步骤:步骤1. 合成9-羟基-2,3,6,7-四氢-1H,5H,11H吡喃并[2,3-F]吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-11-酮a. 将适量丙二酸二苯酯与8-羟基久洛里定加入无水甲苯中,100℃反应8-12小时,b. 待反应冷至室温后过滤,固体用乙醚洗涤后真空干燥,得到灰绿色固体9-羟基-2,
3,6,7-四氢-1H,5H,11H吡喃并[2,3-F]吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-11-酮;
步骤2. 合成9-氯-11-氧代-2,3,6,7-四氢-1H,5H,11H吡喃并[2,3-F]吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-10-甲醛.在氮气保护条件下,将适量干燥重蒸的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)缓慢加入等体积的三氯氧磷(POCl3)中,在20-50 ℃搅拌30分钟,得红色溶液,.将9-羟基-2,3,6,7-四氢-1H,5H,11H吡喃并[2,3-F]吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-11-酮溶于适量N,N-二甲基甲酰胺中,逐滴加入到步骤 的混合溶液中,混合物继续在氮气保护下
60 ℃搅拌反应12小时;
.将步骤 中的反应液倒入适量冰水中,用20%的NaOH溶液调节pH至5 6,产生大量沉~淀,过滤,固体用适量去离子水洗涤3次,真空干燥,得9-氯-11-氧代-2,3,6,7-四氢-1H,5H,
11H吡喃并[2,3-F]吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-10-甲醛;
步骤3. 合成多信号荧光探针(E)-3-(9-氯-11-氧代-2,3,6,7-四氢-1H,5H,11H-吡喃并[2,3-f]吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-10-基)-2-氰基丙烯酸(酯). 将9-氯-11-氧代-2,3,6,7-四氢-1H,5H,11H吡喃并[2,3-F]吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-
10-甲醛和氰乙酸(酯)加入适量无水二氯甲烷中,滴加适量三乙胺,室温搅拌反应;
. 将步骤中反应液滴加入适量无水乙醇中,过滤,将所得固体真空干燥,得权利要求1所述的荧光分子探针(E)-3-(9-氯-11-氧代-2,3,6,7-四氢-1H,5H,11H-吡喃并[2,3-f]吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-10-基)-2-氰基丙烯酸(酯)。
3.如权利要求2所述的多信号荧光探针的合成,其特征在于,所述步骤的9-氯-11-氧代-2,3,6,7-四氢-1H,5H,11H吡喃并[2,3-F]吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-10-甲醛和氰乙酸(酯)摩尔比为1:1.5-2。
4.如权利要求1所述的多信号荧光探针同时区分检测Hcy、Cys和GSH的应用,其特征在于,所述的荧光分子探针能够在环境中定量检测Hcy、Cys和GSH,利用共聚焦显微荧光成像技术可实现蓝、绿、红三种颜色分别成像细胞内Hcy、Cys和GSH的应用。