1.一种异香豆素类衍生物的制备方法,其特征在于具体包括如下步骤:(1)发酵生产:将保藏号为CCTCC No:M2014086的焦曲霉(Aspergillus ustus)划线复活,然后挑一个单菌落接种到PDB液体培养基中,在28℃、150rpm条件下,培养5天后作为种子液;再将种子液按体积比5‑20%的比例接种到大米培养基中,于28℃,静置发酵30天;
(2)粗浸膏的获得:往发酵后的锥形瓶中加入甲醇,将固体浸没,超声15分钟,静置过夜后,将甲醇提取液用纱布过滤去除固体残渣;将固体残渣重复浸提3‑5次后,将甲醇提取液合并后蒸干除去甲醇,然后用水溶解,再加入与水溶液等体积的乙酸乙酯重复萃取5次,合并萃取液后减压浓缩除去乙酸乙酯,获得粗浸膏;
(3)化合物的分离纯化:将粗浸膏用二氯甲烷和甲醇混合溶剂溶解后,加200‑300目硅胶拌样,采用体积比为2:1的石油醚/乙酸乙酯为洗脱剂,对粗浸膏进行减压硅胶柱层析,收集洗脱组分;采用二氯甲烷和甲醇混合溶剂为洗脱剂,对洗脱组分进行凝胶柱层析,收集洗脱组分;将洗脱组分再经过反相中压柱色谱分离,采用甲醇和水为洗脱剂,梯度是从体积分数30%甲醇线性洗脱到100%甲醇,洗脱时间为120分钟,流速为20mL/min,收集出峰时间为
80‑90分钟的流分,最后该流分经半制备反相高效液相色谱分离纯化得到异香豆素类衍生物,其结构如式I所示:
其中所述的PDB液体培养基的配方如下:马铃薯200g、葡萄糖20g,海水晶35g以及蒸馏水1L;所述的大米培养基的配方如下:大米100g、海水晶3.5g以及蒸馏水100mL,所述的二氯甲烷和甲醇混合溶剂中二氯甲烷与甲醇的体积比为1:1,所述的半制备反相高效液相色谱的洗脱液为乙腈与水按体积比28:72混合而成。