欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13095918853 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13095918853
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2018103266274
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一段桑源阴沟肠杆菌特异序列,其特征在于,如SEQ ID NO.1所示。

2.权利要求1所述特异序列在检测阴沟肠杆菌或桑枯萎病方面的应用。

3.一种检测阴沟肠杆菌或桑枯萎病的引物组,其特征在于,该引物组能特异性的扩增权利要求1所述特异序列或其片段。

4. 一组检测阴沟肠杆菌或桑枯萎病的引物组Yt4,其特征在于,包括引物Yt4-FIP、Yt4-BIP、Yt4-F3、Yt4-B3,其核苷酸序列依次如SEQ ID NO.2~5所示。

5.权利要求4所述引物组Yt4在检测阴沟肠杆菌或桑枯萎病方面的应用或在制备阴沟肠杆菌或桑枯萎病的检测产品方面的应用。

6.一种检测阴沟肠杆菌或桑枯萎病的方法,其特征在于,以待测样品DNA为模板,利用权利要求4所述引物组Yt4进行恒温扩增反应或荧光恒温扩增反应,根据反应结果判断待测样品中是否含有阴沟肠杆菌。

7.根据权利要求6所述方法,其特征在于,反应结果的判断方法为:荧光扩增出现S型曲线则待测样品中含有阴沟肠杆菌;或将扩增产物进行凝胶电泳,如果出现特异性阶梯状条带,则判定待测样品中含有阴沟肠杆菌;或向扩增产物中加入显色液,如果扩增产物变色,则判定待测样品中含有阴沟肠杆菌。

8. 根据权利要求6所述方法,其特征在于,所述扩增反应的条件为62~64℃反应55~

65 min;扩增反应体系为:2×反应缓冲液 12.5µL,40µmol/L外引物F3 0.5µL,10µmol/L外引物B3 0.5µL,40µmol/L内引物FIP 1µL,40µmol/L内引物BIP 1µL,8U/µL Bst DNA聚合酶1µL,样品DNA 2µL,ddH2O补足至 25 µL。

9.一种检测阴沟肠杆菌或桑枯萎病的试剂盒,其特征在于,含有权利要求4所述引物组Yt4。

10. 根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,还含有2×反应缓冲液、Bst DNA聚合酶、阳性质粒、密封液、无菌水和显示液。