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专利号: 2018103770270
申请人: 安徽师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 染料;涂料;抛光剂;天然树脂;黏合剂;其他类目不包含的组合物;其他类目不包含的材料的应用
更新日期:2023-12-08
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种葡萄糖的检测方法,其特征在于,所述检测方法包括:

1)将已知浓度的检测底物、葡萄糖氧化酶于磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲溶液中进行酶促反应,然后加入类Fenton试剂、柠檬酸盐修饰的NaYF4:Yb,Tm/Mn上转换纳米粒子于黑暗下进行类Fenton反应,接着检测荧光强度,然后以所述检测底物的浓度为横坐标,荧光强度为纵坐标绘制工作曲线或者计算出工作曲线方程;

2)将未知浓度的检测底物、葡萄糖氧化酶于磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲溶液中进行酶促反应,然后加入类Fenton试剂、柠檬酸盐修饰的NaYF4:Yb,Tm/Mn上转换纳米粒子于黑暗下进行类Fenton反应,接着检测荧光强度,然后根据所述工作曲线或者工作曲线方程计算出所述检测底物的浓度;

其中,所述检测底物为葡萄糖;

所述柠檬酸盐修饰的NaYF4:Yb,Tm/Mn上转换纳米粒子通过以下方法的制备得到,所述制备方法包括:

①将碱、水、油酸、C1‑C3的醇、锰源、镱源、钇源、铥源和NaF进行搅拌,接着水热反应、离心分离得到油酸包覆的NaYF4:Yb,Tm/Mn上转换纳米粒子(OA‑NaYF4:Yb,Tm/Mn UCNPs);

②将所述OA‑NaYF4:Yb,Tm/Mn上转换纳米粒子分散于醇中,接着加入三氯甲烷和柠檬酸盐溶液进行配体交换,反应后得到柠檬酸盐修饰的NaYF4:Yb,Tm/Mn上转换纳米粒子;

其中,在步骤①中,相对于0.3g的碱,所述水的用量为0.5‑3mL,所述油酸的用量为2‑

8mL,所述醇的用量为5‑15mL,所述锰源的用量为0.04‑0.08g,所述钇源的用量为0.1‑0.3g,所述镱源的用量为0.04‑0.08g,所述铥源的用量为5‑9mg,所述NaF的用量为0.05‑0.3g;在步骤①中,所述水热反应至少满足以下条件:反应温度为180‑220℃,反应时间为6‑10h;在步骤②中,相对于30mg所述OA‑NaYF4:Yb,Tm/Mn上转换纳米粒子,所述醇的用量为1‑3mL,所述三氯甲烷的用量为1‑3mL,柠檬酸盐的用量为0.05‑0.15g;在步骤②中,所述配体交换反应至少满足以下条件:反应温度为20‑40℃,反应时间为10‑15h。

2.根据权利要求1所述的检测方法,其中,在步骤①中,所述搅拌至少满足以下条件:搅拌温度为15‑35℃,搅拌时间为10‑20min。

3.根据权利要求1所述的检测方法,其中,所述铥源选自五水合硝酸铥、氧化铥、氯化铥和醋酸铥中的至少一者,所述锰源选自四水合氯化锰、无水氯化锰、无水硫酸锰和一水合硫酸锰中的至少一者,所述镱源选自氯化镱、五水硝酸镱、氧化镱和碳酸镱中的至少一者,所述钇源选自硝酸钇、氧化钇、六水合氯化钇和磷酸钇中的至少一者,所述醇选自甲醇、乙醇和丙醇中的至少一者。

4.根据权利要求1所述的检测方法,其中,所述柠檬酸盐选自柠檬酸一钠、柠檬酸二钠和柠檬酸三钠中的至少一者。

5.根据权利要求1所述的检测方法,其中,在步骤1)和2)中的所述酶促反应各自独立地满足以下条件:反应温度为35‑40℃,反应时间为25‑40min。

6.根据权利要求1所述的检测方法,其中,在步骤1)和2)中的所述类Fenton反应各自独立地满足以下条件:反应温度为20‑30℃,反应时间为10‑20min。

2+

7.根据权利要求1‑4中任意一项所述的检测方法,其中,所述类Fenton试剂是含有Co ,

2+

体系中Co 的浓度为0.04‑0.13mmol/L。

8.根据权利要求1‑4中任意一项所述的检测方法,其中,相对于0.3‑0.8mL的磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲溶液,所述类Fenton试剂的用量为0.1‑0.3mL,所述柠檬酸盐修饰的NaYF4:Yb,Tm/Mn上转换纳米粒子的用量为0.045‑0.29mg;检测体系中葡萄糖氧化酶的浓度为

0.35‑0.45mg/mL。

9.根据权利要求1‑4中任意一项所述的检测方法,其中,所述磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲溶液的pH为5.0‑6.0。

10.根据权利要求1‑4中任意一项所述的检测方法,其中,所述工作曲线方程为I0–I=

180.75+360.06lgC;其中,I0未加检测底物时的体系的荧光强度,I为添加检测底物时体系的荧光强度,C为检测底物的浓度。

11.一种如权利要求1‑10任意一项所述的检测方法在检测血清中葡萄糖上的应用。