1.一种替格瑞洛中间体的生物合成方法,其特征在于,先将化合物(2)经氧化反应制得化合物(3);所述化合物(3)经邻位二醇保护反应得到化合物(4);所述化合物(4)与环氧乙烷经加成反应制得化合物(5);所述化合物(5)经生物转换作用制得替格瑞洛中间体化合物(1),其反应式如下所示:
2.根据权利要求1所述的替格瑞洛中间体的生物合成方法,其特征在于,所述化合物(2)经氧化反应制得化合物(3)的氧化反应的溶剂选自无水甲醇、无水乙醇、无水叔丁醇、无水异丙醇、无水仲丁醇、无水THF、无水乙醚、无水甲苯、无水二甲苯、无水二氯甲烷、无水2-甲基四氢呋喃和无水TBME中的一种或几种,所述氧化反应的反应温度为20℃~60℃。
3.根据权利要求1所述的替格瑞洛中间体的生物合成方法,其特征在于,所述化合物(3)经邻位二醇保护反应得到化合物(4)的溶剂为无水丙酮、无水四氢呋喃、无水乙醚、无水甲基叔丁基醚、无水二氯甲烷、无水甲苯、无水叔丁基醚、无水2-甲基四氢呋喃中的一种或几种,所述保护反应的反应温度为20℃~60℃。
4.根据权利要求1所述的替格瑞洛中间体的生物合成方法,其特征在于,所述化合物(4)与环氧乙烷经加成反应制得化合物(5)的加成反应的溶剂为无水四氢呋喃、无水乙醚、无水甲基叔丁基醚、无水二氯甲烷、无水甲苯、无水叔丁基醚、无水2-甲基四氢呋喃中的一种或几种;反应的温度为0℃~30℃;反应的试剂选自氯化铜,氯化亚铜,溴化铜,溴化亚铜,氯化锌,三氯化铝,三氯化铁,三氟甲烷磺酸镱,四氯化钛和氯化银中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的替格瑞洛中间体的生物合成方法,其特征在于,所述化合物(5)经生物转换作用制得替格瑞洛中间体化合物(1)的生物转换酶为其原始体或者该生物转换酶的定向突变体;所述生物转换酶的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示;所述定向突变体为T68V,N76L,L213E和V302M中的一种或者几种。
6.根据权利要求1所述的替格瑞洛中间体的生物合成方法,其特征在于,所述化合物(5)经生物转换作用制得替格瑞洛中间体化合物(1)的反应溶剂选自水/二甲基亚砜 、水/甲醇、水/乙醇、水/异丙醇、水/丙酮、水/二甲基亚砜 /甲醇和水/二甲基亚砜 /丙酮中的一种或者几种。
7.根据权利要求1所述的替格瑞洛中间体的生物合成方法,其特征在于,所述化合物(5)经生物转换作用制得替格瑞洛中间体化合物(1)的反应中还包括氨源,所述氨源选自异丙胺、三乙胺、丙胺、乙胺和丁胺中的一种或者几种,浓度为0.2-1M。
8.根据权利要求1-7任一所述的替格瑞洛中间体的生物合成方法,其特征在于,所述化合物(5)经生物转换作用制得替格瑞洛中间体化合物(1)的反应中化合物(5)的质量浓度为
2-200g/L,反应温度为22-45℃,反应pH为7.5-8.5。
9.根据权利要求5所述的替格瑞洛中间体的生物合成方法,其特征在于,所述化合物(5)经生物转换作用制得替格瑞洛中间体化合物(1)的反应中化合物(5)和生物转换酶的质量浓度比为1:1~70:1。