1.同时检测过氧化氢和过氧化亚硝基阴离子的近红外荧光探针,其特征在于:该近红外荧光探针具有下列结构:;
所述近红外荧光探针的合成方法,包括如下步骤:
步骤一、按照对碘苯胺:硒:Cu2O:乙二胺:KOH=1:0.5-1.05:0.01-0.05:0.01-0.05:
0.01-0.05的摩尔比依次取对碘苯胺、硒、Cu2O、乙二胺和KOH进行混合,之后向所得混合物中加入其质量10-12倍的DMSO溶剂,充分搅拌至完全溶解后,加热至100-180℃进行微波反应1-3h,过滤,并对所得滤渣进行干燥,制得二对氨基苯硒醚,备用;
步骤二、按照二对氨基苯硒醚:2-氯硒基苯甲酰氯=1:1的摩尔比称取2-氯硒基苯甲酰氯,加入到步骤一制得的二对氨基苯硒醚中,之后再向其中加入乙醚和水的混合溶剂400-
1000mL,在室温下搅拌2-5h,过滤,并对所得滤渣进行干燥,制得2-(4-(4-氨基-苯基)-硒代)-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮,备用;
步骤三、另称取与步骤二制得的2-(4-(4-氨基-苯基)-硒代)-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮等摩尔量的碘乙基三苯基碘化鏻,并与2,3,3-三甲基-3H-吲哚混合,混合后向其中加入甲苯至溶解,之后回流反应6-24h,制得2,3,3-三甲基-1-三苯基鏻乙基-3H-吲哚盐,备用;
步骤四、按照2,3,3-三甲基-1-三苯基鏻乙基-3H-吲哚盐:2-氯-1-甲酰基-3-羟甲烯基环己烯=1:1的摩尔比称取2-氯-1-甲酰基-3-羟甲烯基环己烯,加入到步骤三制得的2,3,3-三甲基-1-三苯基鏻乙基-3H-吲哚盐中,之后向其中加入醋酸钠和醋酸酐至溶解,在室温下反应2-12h,制得花青素染料7-氯取代物,备用;
步骤五、按照等摩尔量取步骤二制得的2-(4-(4-氨基-苯基)-硒代)-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮和步骤四制得的花青素染料7-氯取代物混合,向混合物中加入甲苯至溶解,回流反应6-24h,之后用硅胶柱层析分离得蓝紫色固体纯品,即为成品同时检测过氧化氢和过氧化亚硝基阴离子的近红外荧光探针。
2.如权利要求1所述的同时检测过氧化氢和过氧化亚硝基阴离子的近红外荧光探针,其特征在于:步骤一所述干燥时温度为15-60℃。
3.如权利要求1所述的同时检测过氧化氢和过氧化亚硝基阴离子的近红外荧光探针,其特征在于:步骤二所述乙醚和水的混合溶剂中,乙醚和水的体积比为1:1。
4.如权利要求1所述的同时检测过氧化氢和过氧化亚硝基阴离子的近红外荧光探针,其特征在于:步骤二所述乙醚和水的混合溶剂替换为乙腈或者二氯甲烷。
5.如权利要求1所述的同时检测过氧化氢和过氧化亚硝基阴离子的近红外荧光探针,其特征在于:步骤四加入醋酸钠和醋酸酐替换为加入正丁醇和甲苯的混合溶液,其中正丁醇和甲苯的体积比为7:3。
6.如权利要求1所述的近红外荧光探针在细胞内H2O2和ONOO-的差异化同时定量检测中的应用。
7.如权利要求1所述的近红外荧光探针在动态观测研究活线粒体内活性氧自由基的产生、代谢、相互转化及其动态损伤生物机体的过程通路及机制中的应用。
8.如权利要求1所述的近红外荧光探针在细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期的指标检测中的应用。