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专利号: 2018105105879
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组,其特征在于包含正向内引物SVV-FIP、反向内引物SVV-BIP、正向外引物SVV-F3、反向外引物SVV-B3、正向环引物SVV-LF和反向环引物SVV-LB,其核苷酸序列如下所示:SVV-FIP:5′-CTGTGTTCAGCAGGCTGGTCG-CGTCGCATCAAGATTACCGG-3′;

SVV-BIP:5′-GGACTGCTCTGGCATTGACCT-CAACCAGAAGGTCGTCACC-3′;

SVV-F3:5′-AGATCCCTGGCTGTCTCG-3′;

SVV-B3:5′-GCCACCTCATTGAAGTCCA-3′;

SVV-LF:5′-GGCACAACCAGAGGGGA-3′;

SVV-LB:5′-TGACATGGTTGATATCATCGCC-3′。

2.权利要求1所述的检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组在检测塞尼卡谷病毒领域中的应用。

3.一种检测塞尼卡谷病毒的试剂盒,其特征在于包含权利要求1所述的检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组。

4.根据权利要求3所述的检测塞尼卡谷病毒的试剂盒,其特征在于还包含10×Thermopol Buffer、dNTP、Calcain、MnCl2、MgSO4、Bst DNA Polymerase、AMV。

5.根据权利要求4所述的检测塞尼卡谷病毒的试剂盒,其特征在于包含10×Thermopol Buffer、浓度为2.5mM的dNTP、浓度为250μmol/L的Calcain、浓度为25mM的MnCl2、浓度为10μmol/L的SVV-FIP+SVV-BIP、浓度为10μm ol/L的SVV-LF+SVV-LB、浓度为10μmol/L的SVV-F3+SVV-B3、浓度为100m M的MgSO4、浓度为8U/μL的Bst DNA Polymerase、浓度为5U/μL的AMV。

6.权利要求3~5任一项所述的检测塞尼卡谷病毒的试剂盒在检测塞尼卡谷病毒领域中的应用。

7.根据权利要求6所述的检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组在检测塞尼卡谷病毒领域中的应用,其特征在于包含如下步骤:(1)配制RT-LAMP反应体系,具体反应体系如下所示:(2)反应:将步骤(1)配制好的反应体系进行RT-LAMP反应;

(3)结果判读。

8.根据权利要去7所述的检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组在检测塞尼卡谷病毒领域中的应用,其特征在于:所述的反应的具体条件为:61℃反应50min。

9.根据权利要去7所述的检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组在检测塞尼卡谷病毒领域中的应用,其特征在于:所述的结果判读的具体方式为:在白光或紫外光下根据反应前后反应溶液颜色变化即进行结果判定;

其中,白光下,绿色为阳性样品,橘黄色为阴性样品;

紫外光下,荧光绿色为阳性样品,无荧光为阴性样品。