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专利号: 2018106805159
申请人: 商丘师范学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 农业;林业;畜牧业;狩猎;诱捕;捕鱼
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种草莓叶片愈伤组织诱导方法,其特征在于,包括以下步骤:S1,摘取草莓成熟叶片,洗净,用乙醇溶液浸泡消毒,无菌水冲洗,再放入0.1g/100ml的HgCl2溶液浸泡消毒6min,无菌水冲洗,吸干水分,得到无菌叶片,备用;其中,草莓品种为艳丽品种,草莓成熟叶片的摘取时间为3‑4月;

S2,对无菌叶片沿叶片主脉方向进行刻伤痕处理,每个叶片刻伤痕处理的个数为3‑4个,每个伤痕的长度为1‑4mm,然后将刻伤痕后的叶片接种在诱导培养基中,25±2℃培养,直至长出愈伤组织,得到叶片愈伤组织;

所述诱导培养基按以下方法配制:1L水中加入6g琼脂粉,煮沸至琼脂粉完全溶解,然后加入4.74g MS固体培养基,加入30g蔗糖并加热溶解,调pH至5.8‑6.0,然后加入2mg的TDZ和

0.1mg的NAA,灭菌;

S3,取出叶片愈伤组织,切块,置于增殖培养基中,25±2℃培养,直至获得白色疏松草莓叶片愈伤组织;

所述增殖培养基按以下方法配制:1L水中加入6g琼脂粉,煮沸至琼脂粉完全溶解,然后加入4.74g MS固体培养基,加入30g蔗糖并加热溶解,调pH至5.8‑6.0,然后加入2mg的6‑BA和0.1mg的NAA,灭菌。

2.根据权利要求1所述的草莓叶片愈伤组织诱导方法,其特征在于,S1中,洗净草莓成熟叶片的方法是,先用自来水冲洗,再用2g/L洗衣粉溶液浸泡2h,最后用自来水冲洗干净。

3.根据权利要求1所述的草莓叶片愈伤组织诱导方法,其特征在于,S1中,所述乙醇溶液的体积分数为75%,乙醇溶液的消毒时间为25s。

4.根据权利要求1所述的草莓叶片愈伤组织诱导方法,其特征在于,S2和S3中培养条件相同,如下:光照时间16h/d,光强1500‑2000lx。