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专利号: 2018107833137
申请人: 淮阴师范学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种植物中磺胺类抗生素提取与测定的方法,其特征在于包括如下步骤:步骤一、两次多步提取:称取液氮研磨处理过的植物样品于玻璃离心管中,加入甲醇/盐酸混合提取液,超声、涡旋、离心后收集上清液,固相残渣中再加入丙酮提取液,超声、涡旋、离心后收集上清液,合并两次的上清液待用;

步骤二、固相萃取:将步骤一所得的上清液通过事先用甲醇和超纯水活化的Waters Oasis HLB固相萃取柱,再用甲醇洗脱固相萃取柱,收集全部洗脱液,最后将洗脱液在水浴下用氮气吹干,再加入甲醇溶解,溶液过滤膜后收集待测;

步骤三、色谱测定:通过高效液相色谱仪对步骤二过滤后的样品进行含量分析;

其中,甲醇/盐酸混合提取液中甲醇与盐酸的体积比为80:20‑95:5;

所述磺胺类抗生素为磺胺嘧啶,磺胺甲基嘧啶,磺胺‑5‑甲氧嘧啶,磺胺甲恶唑和磺胺间二甲氧嘧啶;

所述高效液相色谱条件为:采用Waters2695高效液相色谱仪,波长为260‑270nm;色谱柱选用250mm×4.6mm,5.0μm的Phenomenex Gemini C18色谱柱;流动相为甲醇和0.5%乙酸,柱温35℃,流速1mL/min,进样量20μL,梯度洗脱条件:0min,甲醇:0.5%乙酸体积比为10:90,

15min,甲醇:0.5%乙酸体积比为30:70。

2.根据权利要求1所述的一种植物中磺胺类抗生素提取与测定的方法,其特征在于:所述步骤一、称取0.5‑1.0g液氮研磨处理过的植物样品于30mL玻璃离心管中,加入10mL甲醇/盐酸混合提取液,超声10‑30min,涡旋2‑5min,以4000r/min的转速离心10‑30min后收集上清液,然后固相残渣中再加入10mL丙酮提取液,超声10‑30min,涡旋2‑5min,以4000r/min的转速离心10‑30min后收集上清液,合并两次的上清液待用。

3.根据权利要求1所述的一种植物中磺胺类抗生素提取与测定的方法,其特征在于:所述步骤二、将步骤一所得的上清液通过事先用5mL甲醇和5mL超纯水活化的6mL/500mg的Waters Oasis HLB固相萃取柱,再用5mL甲醇洗脱固相萃取柱,洗脱液速率2mL/min,收集全部洗脱液,最后将洗脱液在25‑40℃水浴下用氮气吹干,然后加入2mL甲醇溶解,溶液过0.45μm或0.22μm滤膜后收集于样品瓶中待测。