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专利号: 2018108042956
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种改变酿酒酵母氧胁迫抗性的方法,其特征在于,所述方法是缺失突变Rad30基因以降低菌株氧胁迫抗性或者过表达Rad30基因以增强菌株的氧胁迫抗性;所述Rad30基因的核苷酸序列如NCBI上GeneID: 852028的核苷酸序列;所述菌株是Saccharomyces cerevisiaeBY4741,基因型为MATα His3Δ1 Leu2Δ0 Met15Δ0 Ura3Δ0。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述缺失突变具体是:将标记基因Leu2同基因Rad30的左右臂连接起来,构建敲除框,将测序正确的敲除框导入酿酒酵母感受态细胞中,通过同源臂重组将基因Rad30替换成Leu2,利用重组后的菌株含有Leu2基因而能合成亮氨酸这一特征筛选缺失Rad30基因的的突变菌株,经基因组PCR和测序验证正确的菌株即为缺失突变Rad30基因的菌株Rad30Δ。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述过表达具体是将Rad30基因连接到质粒PY26上,由强启动子启动转录翻译,得到重组质粒PY26‑Rad30,然后将重组质粒转化到酵母中,利用重组质粒上的Ura3基因来筛选阳性转化子,最后提取质粒验证得到过表达菌株Rad30Δ/Rad30。