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专利号: 2018108942606
申请人: 河池学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 固体废物的处理;被污染土壤的再生〔3,6〕
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种利用植物-微生物联合修复砷污染土壤的方法,其特征在于,包括以下步骤:在砷污染土壤中种植砷富集植物风车草,将腐生葡萄球菌CP3制备成菌液,在风车草种植7天后,将菌液灌根接种在砷富集植物风车草根际土壤中,每千克土壤接种菌液15~20mL,接种

1~3次,利用砷富集植物风车草对砷的吸收作用和耐砷细菌腐生葡萄球菌CP3的强化作用联合富集土壤中砷。

2.如权利要求1所述的一种利用植物-微生物联合修复砷污染土壤的方法,其特征在于,所述砷富集植物风车草通过以下方法筛选得到:选取砷污染地区长势良好的草本植物鬼针草、南艾蒿、蜈蚣草、风车草、藜、苦荬菜、藿香蓟、木芙蓉、砖子苗、大叶醉鱼草、苎麻、灯芯草和飘拂草属,连根带土一并挖起;将各草本植物与各草本植物上的根际土壤分离,分别得到各草本植物材料和各土壤样品;将各土壤样品和各草本植物材料分别进行预处理,测定各土壤样品的pH,对各土壤样品和各草本植物材料中砷含量进行测定,并计算各草本植物材料对砷的迁移率和富集率,根据测定结果,筛选出耐砷性最强的草本植物风车草。

3.如权利要求2所述的一种利用植物-微生物联合修复砷污染土壤的方法,其特征在于,所述耐砷细菌腐生葡萄球菌CP3通过以下方法筛选得到:在无菌条件下,将10g的经过预处理且砷浓度最高的土壤样品加入到含有玻璃珠的

90mL无菌水中,漩涡振荡器振荡摇匀,取1mL加入到9mL无菌水中,接着稀释成浓度为10-6、

10-7、10-8的土壤悬浊液,然后分别取200μL涂布于LB固体培养基,每个梯度设三个重复,置于37℃培养箱中培养,待菌落长出后挑取外形明显不同的单菌落划线培养,得到初筛细菌;

将初筛细菌接种到LB液体培养基中,37℃、180rpm培养12h,用灭菌后的离心管10000rpm离心后,倒掉上清液,控干水分,得到菌体;然后配制100mL含砷浓度为5mg·L-1的LB液体培养基,灭菌后在超净台中称取菌体1g加入到培养基中,37℃、180rpm培养12h后,10000rpm离心,测定上清液中砷的浓度,根据测定结果,筛选出耐砷性最强的微生物CP3,对其单菌落连续4次采用平板线划线分离法进行纯化,经鉴定该微生物为腐生葡萄球菌CP3。

4.如权利要求2所述的一种利用植物-微生物联合修复砷污染土壤的方法,其特征在于,所述各土壤样品的预处理,具体包括以下步骤:将各土壤样品于阴凉干燥处风干,挑去石子,放入研钵中磨碎过0.15mm筛,将过筛后的样品干燥并放入干燥器中备用。

5.如权利要求2所述的一种利用植物-微生物联合修复砷污染土壤的方法,其特征在于,所述各草本植物材料的预处理,具体包括以下步骤:将草本植物材料清洗干净,晾干,然后50℃干燥48小时,对植株的根部和地上部分分别进行破碎,破碎后的样品分开保存,备用。

6.如权利要求1所述的一种利用植物-微生物联合修复砷污染土壤的方法,其特征在于,所述菌液通过将腐生葡萄球菌CP3接种到100mL LB液体培养基中,培养12h制备得到。

7.如权利要求1所述的一种利用植物-微生物联合修复砷污染土壤的方法,其特征在于,所述风车草在砷污染土壤中培养的条件为:风车草种入后,加入营养液,10天后补加营养液,且定期浇水,保持砷污染土壤含水量为最大持水量的60~80%。

8.如权利要求7所述的一种利用植物-微生物联合修复砷污染土壤的方法,其特征在于,所述营养液为市售的水土通用型营养液。