1.一种固定漆酶的方法,其特征在于,该方法为:将25.0~35.0mg醛基化的漆酶固载材料、10~20mL pH=7.0磷酸盐缓冲液、0.0015~0.0030g的漆酶混合,摇床中振荡反应6~‑1
8h,转速150~200r·min ,磁铁分离,缓冲液反复洗涤磁性产物,直至上清液中检测不到蛋白质为止;固定化漆酶的最适温度是20℃,最适pH为4,在4℃下保存14天仍保持约80%的酶活力;
漆酶固载材料通过以下步骤制备得到:
(1)埃洛石的纯化:用盐酸对埃洛石进行纯化,在8.0~20.0g埃洛石中加入100~200mL ‑1
0.5mol·L 的HCl,室温搅拌10h,去离子水洗涤,直至上清液为中性,离心分离,50℃烘干
12h后备用;
(2)氮气保护下,将5.0~10.0g纯化后的埃洛石、1.47~2.91g六水氯化铁和0.8~1.5g七水硫酸亚铁加入到100~200mL去离子水中,搅拌均匀,逐滴滴加氨水调节pH至9.0~
10.0,70℃冷凝回流3h,磁铁分离得到黑色沉淀物,去离子水洗涤黑色沉淀物,60℃真空干‑1燥12h,得到HNTs‑Fe3O4;氨水的浓度为2.0mol·L ;
(3)将1.5~3.0g的HNTs‑Fe3O4分散于去离子水中,加入0.64~1.45g无水碳酸钠并升温至80℃,搅拌反应2h;再加入一定量盐酸溶液至溶液的pH值为8,加入3.0~6.0g的KH‑550反应3~4h;磁力分离得到产物,用去离子水和无水乙醇多次洗涤产物;80℃条件下干燥后,研磨得m‑HNTs‑Fe3O4;
(4)向50mL或100mL锥形瓶中加入0.05~0.1g的m‑HNTs‑Fe3O4、10~20mL磷酸盐缓冲溶液、8.0%的戊二醛12~20mL,室温下放入摇床反应10~12h,磁铁分离,去离子水充分洗涤磁性产物,得到漆酶固载材料;
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磷酸盐缓冲溶液的溶度为0.2mol·L ,pH=7.0;
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摇床转速150~200r·min 。