1.一种细叶石仙桃药材指纹图谱的建立方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)对照品溶液的制备:精密称取没食子酸标准品、绿原酸标准品、丁香醛标准品,分别置10mL 容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,制得浓度分别为0.125g/ml、0.0588g/ml、0.112g/ml的溶液,再用0.45μm 微孔滤膜过滤,即为对照品溶液;
(2)供试品溶液的制备:取细叶石仙桃粗粉2.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加80mL体积浓度为80%的甲醇超声处理1.5h,用体积浓度为80%的甲醇溶液补重,摇匀后过滤,取续滤液,离心10min,取上清液,用0.45μm微孔滤膜过滤,即为供试品溶液;
(3)高效液相色谱分析
色谱条件为:用Agilent5 TC-C18,250mm×4.6mm,5μm色谱柱;以乙腈为流动相B,以体积百分含量为0.4%的磷酸溶液为流动相D,采用以下梯度洗脱的方式进行梯度洗脱:从0~
26mim,流动相B的体积百分含量由18%提高至33%,流动相D 的体积百分含量由82%降低至67%;26~38mim,流动相B的体积百分含量由33%提高至38%,流动相D 的体积百分含量由67%降低至62%;38~58mim,流动相B的体积百分含量由38%提高至50%,流动相D 的体积百分含量由62%降低至50%;58~68mim,流动相B的体积百分含量由50%提高至60%,流动相D 的体积百分含量由50%降低至40%;流速:1.0 mL·min-1;进样量:10μL;
(4)测定:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入高效液相色谱仪,测定,记录60分钟色谱图,以绿原酸为特征图谱参照物,以绿原酸色谱峰为参照物峰,测定10批细叶石仙桃药材的指纹图谱,采用相对保留时间标定中药材的共有指纹峰,得到由其共有特征峰构成的细叶石仙桃药材的标准指纹图谱,所述标准指纹图谱中,共有峰有7个,其中2号峰为绿原酸。
2.根据权利要求1所述的细叶石仙桃药材指纹图谱的建立方法,其特征在于,步骤(3)高效液相色谱分析中的检测波长为280nm,柱温为30℃。
3.根据权利要求1所述的细叶石仙桃药材指纹图谱的建立方法,其特征在于,构建得到的细叶石仙桃药材的标准指纹图谱具有7个共有特征峰,以参照物峰相应的峰为S峰,所述7个共有特征峰的相对保留时间如下:峰1:2.973,峰2:3.832,峰3:9.542,峰4:11.35,峰5:
16.907,峰6:26.71,峰7:28.748。