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专利号: 2018110334581
申请人: 赣南师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种微生物体内基于脂肪酸合成脂肪醇乙酸酯的方法,其特征在于基于脂肪酸为前体分子产脂肪醇乙酸酯:将羧酸还原酶CAR基因和醇乙酰基转移酶ATF1基因、醛还原酶AHR及硫酯酶‘TESA基因、磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶Sfp基因,重组到载体上;将上述载体转入到微生物中,实现上述五个基因在微生物中的高量表达,得到工程菌株;表达‘TESA用于水解脂酰‑ACP产生脂肪酸,表达CAR用于催化脂肪酸还原为脂肪醛,表达Sfp用于活化CAR酶,表达AHR用于随后催化脂肪醛还原形成脂肪醇,表达ATF1用于最终催化脂肪醇与乙酰辅酶A反应合成脂肪醇乙酸酯,脂肪酸和乙酰辅酶A均可由微生物发酵单糖或甘油合成,为此上述构建的工程菌可有效的将单糖或甘油转化为脂肪醇乙酸酯,所述微生物为细菌或酵母中的任意一种。

2.根据权利要求1所述的一种微生物体内基于脂肪酸合成脂肪醇乙酸酯的方法,其特征在于,

所述醛还原酶AHR基因核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;所述醛还原酶AHR基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示;

所述醇乙酰基转移酶ATF1基因核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示;所述醇乙酰基转移酶ATF1基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示;

所述羧酸还原酶CAR基因核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示;所述羧酸还原酶CAR基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示;

所述磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶Sfp基因核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示;所述磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶Sfp基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示;

所述硫酯酶‘TESA核苷酸序列如SEQ ID NO:11所示;所述‘TESA编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示。

3.根据权利要求1所述的一种微生物体内基于脂肪酸合成脂肪醇乙酸酯的方法,其特征在于:所述微生物包含醇乙酰基转移酶ATF1基因的核酸序列;所述编码醇乙酰基转移酶ATF1基因的核酸序列利用乙酰辅酶A和醇类化合物生成脂肪醇乙酸酯;所述醇类化合物为碳源子数大于5但小于30的饱和一元醇和不饱和一元醇。

4.根据权利要求1所述的一种微生物体内基于脂肪酸合成脂肪醇乙酸酯的方法,其特征在于:所述单糖为葡萄糖、半乳糖或果糖中的任意一种。