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专利号: 2018110576896
申请人: 浙江农林大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 农业;林业;畜牧业;狩猎;诱捕;捕鱼
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种云锦杜鹃多倍体的培育方法,其特征在于,包括如下步骤:云锦杜鹃种子灭菌后,以氨磺乐灵进行处理;种子萌发后移栽至育苗块进行培养,然后通过气孔法和流式细胞仪法检测染色体倍性变化,检测确认的染色体加倍植株移栽至温室培养,即可获得多倍体植株;

其中,氨磺乐灵处理云锦杜鹃种子的步骤如下:

用2.5mg·L-1~10mg·L-1氨磺乐灵溶液浸泡灭菌后的种子14h~24h,用无菌水清洗3~

4次后播种于用无菌水浸湿的灭菌滤纸上,置于玻璃培养皿内萌发,萌发条件为温度24℃~

26℃,光照强度1500lx~2000lx,光照时间12h~16h,萌发时间15d~20d;然后将萌发的种子苗移栽至直径3.8cm育苗块,在相同的条件下继续培养30d。

2.根据权利要求1所述的云锦杜鹃多倍体的培育方法,其特征在于,所述云锦杜鹃种子灭菌,包括如下步骤:取0.1~0.3g种子,用无菌水清洗1遍,加10mL~20mL,75%酒精浸泡

30s;倒去酒精用无菌水清洗3~4次,加入10mL~20mL稀释1000倍的多菌灵溶液浸泡15min~30min;倒去多菌灵溶液用无菌水清洗3~4次,加10mL~20mL 10%安替福明溶液灭菌

10min~15min;倒去安替福明溶液用无菌水清洗3~4次,然后以氨磺乐灵进行处理。

3.根据权利要求1所述的云锦杜鹃多倍体的培育方法,其特征在于,所述气孔法和流式细胞仪法检测染色体倍性变化包括如下步骤:剪取植株嫩叶,用10%安替福明浸泡16h~

24h,撕取叶片下表皮,在光学显微镜下统计单位面积气孔数量、测定气孔大小;取同一植株叶片,提取细胞核,通过流式细胞仪测定植株倍性,染色体加倍植株即为多倍体。

4.根据权利要求1所述的云锦杜鹃多倍体的培育方法,其特征在于,所述移栽的过程包括:将倍性检测确定为多倍体的植株移至光照培养室中培养,培养条件为温度22℃~26℃,湿度75~85%,光照强度2000lx~2500lx,光照时间16h,培养时间3个月~4个月;5月~6月龄植株移至温室,炼苗2d~4d,栽入填有松针土、珍珠岩和黄泥,并且直径为10cm~15cm的花盆内,室内放置3d~5d后,移至室外遮阴棚内;所述松针土、珍珠岩和黄泥的比为4∶2∶1。