欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13095918853 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13095918853
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2018110875915
申请人: 闽江学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一种一步沉积法修饰磁电极的蛋白质电化学印迹传感器的制备方法,其特征在于:

首先制备石墨烯@Fe3O4纳米复合材料;再一步电沉积法制备石墨烯@Fe3O4@Au修饰磁电极:然后修饰磁电极表面引入硼酸、氨基、羧基活性基团,为蛋白质印迹提供多识别位点;接着预组装蛋白;采用电化学聚合法制备蛋白质印迹聚合物膜;模板蛋白经洗脱,从而构建蛋白质分子印迹电化学传感器;包括如下步骤:

1) 石墨烯@Fe3O4 纳米材料的制备:石墨烯粉末分散在40 g 乙二醇溶液中,超声分散,依次添加 0.2 g FeCl3·6H2O  , 1.8 g乙酸钠,0.8 g PEG 20000,充分溶解,转移到50 mL反应釜中,水热反应一段时间;所得磁性石墨烯@Fe3O4纳米材料,磁场分离,依次用乙醇、水清洗数遍,60℃ 烘干;

2)一步电沉积法制备石墨烯@Fe3O4@Au修饰磁电极:经打磨好的磁性玻碳电极插入含磁性石墨烯@Fe3O4 纳米材料的HAuCl4弱碱性缓冲溶液中,-1.4~0.6 V范围循环伏安扫描,超纯水淋洗修饰电极;

3)修饰磁电极表面功能化:将步骤2)所制备的修饰电极浸泡于含巯基化合物的混合溶液中,其中巯基化合物混合溶液含巯基苯硼酸和半胱氨酸;自组装一段时间,取出电极,超纯水淋洗,静置,干燥;

4)预组装蛋白:将步骤3)所制备的修饰电极浸泡于蛋白质溶液中,自组装一段时间,取出电极,超纯水淋洗,静置,干燥;

5)电化学聚合蛋白质印迹膜:22.5 mg 丙烯酰胺,3 mg 甲叉双丙烯酰胺,5 mg 蛋白质, 2 mg 过硫酸铵溶解于1 mL 弱碱性缓冲溶液中,将步骤4)所制备的修饰电极浸泡于该混合溶液中,-0.4~0.4 V范围循环伏安扫描,超纯水淋洗修饰电极;

6) 将步骤5)所制备的修饰电极浸泡于洗脱液中,洗去模板蛋白,取出电极,超纯水淋洗,静置,干燥,得到蛋白质印迹电极;

7)将步骤6)所制备的蛋白质印迹电极,浸泡于不同样品溶液中,吸附一段时间,取出电极,超纯水淋洗,静置,干燥,于含0.1mol/L KCl, 5mmol/L的铁氰化钾溶液中扫描,监测峰电流的变化,从而构建蛋白质分子印迹传感器。

2.根据权利要求1所述的一种一步沉积法修饰磁电极的蛋白质电化学印迹传感器的制备方法,其特征在于:步骤1)中所用石墨烯为单层片状羧基化石墨烯,用量为:20~80 mg, 水热反应温度为100~260 ℃,反应时间 5~20 h,弱碱性溶液pH值为:7~10。

3.根据权利要求1所述的一种一步沉积法修饰磁电极的蛋白质电化学印迹传感器的制备方法,其特征在于:步骤2)中所用的电极为磁性玻碳电极其直径=4 mm, 石墨烯@Fe3O4 纳米材料的浓度为:0.05~0.5 mg/mL, HAuCl4弱碱性缓冲溶液的质量浓度为:0.1~ 1.0 %,扫描圈数:3~10圈,扫速:5~100 mV/s。

4.根据权利要求1所述的一种一步沉积法修饰磁电极的蛋白质电化学印迹传感器的制备方法,其特征在于:步骤3)巯基化合物混合溶液含巯基苯硼酸和半胱氨酸,两者摩尔比为

1 :1, 两者摩尔浓度均为:10~30 mmol/L,电极自组装时间为:5~60 min。

5.根据权利要求1所述的一种一步沉积法修饰磁电极的蛋白质电化学印迹传感器的制备方法,其特征在于:步骤4)中的蛋白质为牛血红蛋白、牛血清白蛋白、溶菌酶、卵清白蛋白中的一种,自组装时间为:10~60 min。

6.根据权利要求1所述的一种一步沉积法修饰磁电极的蛋白质电化学印迹传感器的制备方法,其特征在于:步骤5)中扫描圈数:3~10圈,扫速:5~100 mV/s,弱碱性溶液pH值为:

7~10。

7.根据权利要求1所述的一种一步沉积法修饰磁电极的蛋白质电化学印迹传感器的制备方法,其特征在于:步骤6)中所用的洗脱液为 10wt% SDS,1mol/L NaCl,10vol%乙酸,

5wt%SDS与5vol%乙酸混合液中的一种。

8.根据权利要求1所述的一种一步沉积法修饰磁电极的蛋白质电化学印迹传感器的制备方法,其特征在于:步骤7)中吸附时间为30~120 min,峰电流采用差分脉冲伏安法DPV检测,DPV扫描范围-0.2~0.6 V。