1.一种生产米黑根毛霉脂肪酶pRML酶粉的方法,其特征在于,包括步骤:S1:构建含4拷贝数脂肪酶基因pro-rml的能够表达Pro-RML的工程菌株;
S2:培养工程菌株;
S3:经诱导表达获得含米黑根毛霉脂肪酶pRML的发酵液;
S4:将发酵液离心,取上清,调节pH至8.0,之后置于低温环境中,直至上清液表面出现结冰;
S5:向上清液中加入预冷丙酮,静置,弃上清,收集沉淀;
S6:风干沉淀,得米黑根毛霉脂肪酶pRML酶粉。
2.如权利要求1所述的一种生产米黑根毛霉脂肪酶pRML酶粉的方法,其特征在于,所述工程菌株为巴斯德毕赤酵母。
3.如权利要求1所述的一种生产米黑根毛霉脂肪酶pRML酶粉的方法,其特征在于,所述步骤S3中的诱导条件为每24小时补充一次诱导物甲醇,至甲醇终浓度为1.0%(v/v)。
4.如权利要求1所述的一种生产米黑根毛霉脂肪酶pRML酶粉的方法,其特征在于,所述步骤S4具体包括:将发酵液于4℃,5000rpm条件下离心10min,之后取发酵液上清40体积份置于容器中,调节pH至8.0,将容器放置在-20℃的环境内,直至容器内的液体表面出现结冰。
5.如权利要求1所述的一种生产米黑根毛霉脂肪酶pRML酶粉的方法,其特征在于,所述步骤S5具体包括:向容器中加入8体积份-20℃预冷的丙酮,边加边缓慢搅拌,之后-20℃静置10min,再向容器中缓慢加入72体积份-20℃预冷的丙酮,边加边缓慢搅拌,之后-20℃静置2-3h,将容器中的混合液于8000rpm、4℃条件下离心10min,弃上清,收集沉淀。