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专利号: 2018111779262
申请人: 皖西学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种固体复合菌剂在铁皮石斛栽培中的应用,其特征在于,所述固体复合菌剂为:巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)NL‑7菌剂,其保藏编号为:M2012452;

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)NL‑11菌剂,其保藏编号为:M2012453;

嗜热一氧化碳链霉菌(Streptomyces thermocarboxydus)NL‑1菌剂, 其保藏编号为:M 

2012460。

2.根据权利要求1所述的固体复合菌剂在铁皮石斛栽培中的应用,其特征在于,所述巨8

大芽孢杆菌NL‑7菌剂和苏云金芽孢杆菌NL‑11菌剂活菌数均大于4×10 个/g,所述嗜热一8

氧化碳链霉菌NL‑1菌剂活菌数大于1.5×10个/g。

3.根据权利要求1所述的固体复合菌剂在铁皮石斛栽培中的应用,其特征在于,所述巨大芽孢杆菌NL‑7菌剂、苏云金芽孢杆菌NL‑11菌剂和嗜热一氧化碳链霉菌NL‑1菌剂的重量比为1:1:1。

4.权利要求1至3中任一项所述的固体复合菌剂的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:分别将巨大芽孢杆菌NL‑7菌株、苏云金芽孢杆菌NL‑11菌株和嗜热一氧化碳链霉菌NL‑1菌株接种至活化培养基,进行活化培养;将活化后的菌株分别接种至种子培养基培养,获得菌株种子液;按照固体基质重量的3%~5%分别将巨大芽孢杆菌NL‑7菌株种子液、苏云金芽孢杆菌NL‑11菌株种子液和嗜热一氧化碳链霉菌NL‑1菌株种子液接入所述固体基质中培养,获得芽孢杆菌NL‑7菌剂、苏云金芽孢杆菌NL‑11菌剂和嗜热一氧化碳链霉菌NL‑1菌剂;将所述巨大芽孢杆菌NL‑7菌剂、苏云金芽孢杆菌NL‑11菌剂和嗜热一氧化碳链霉菌NL‑1菌剂按照重量比1:1:1混合均匀,即得固体复合菌剂。

5.根据权利要求4所述的固体复合菌剂的制备方法,其特征在于,所述巨大芽孢杆菌9

NL‑7和苏云金芽孢杆菌NL‑11菌株种子液中菌株均不少于1.5×10cfu,所述嗜热一氧化碳链霉菌NL‑1菌株种子液菌丝体达到浓稠。

6.根据权利要求4所述的固体复合菌剂的制备方法,其特征在于,所述巨大芽孢杆菌NL‑7菌株、苏云金芽孢杆菌NL‑11菌株的活化培养基成分为5g蔗糖、2g Na2HPO4、0.5g MgSO4·7H2O、0.005g FeCl3、0.5g CaCO3、18g琼脂粉和1000mL水;所述嗜热一氧化碳链霉菌NL‑1菌株的活化培养基成分为1g KNO3、20g可溶性淀粉、0.5g K2HPO4、0.5g MgSO4·7H2O、

0.5g NaCl、0.5g CaCO3、0.01g FeSO4、18g琼脂粉和1000mL水,每300mL培养基中加入1mL浓度为3%的重铬酸钾;

所述巨大芽孢杆菌NL‑7菌株、苏云金芽孢杆菌NL‑11菌株的种子培养基成分为5g蔗糖、

2g Na2HPO4、0.5g MgSO4·7H2O、0.005g FeCl3、0.5g CaCO3和1000mL水;所述嗜热一氧化碳链霉菌NL‑1菌株的种子培养基成分为1g KNO3、20g可溶性淀粉、0.5g K2HPO4、0.5g MgSO4·

7H2O、0.5g NaCl、0.5g CaCO3、0.01g FeSO4和1000mL水,每300mL培养基中加入1mL浓度为

3%的重铬酸钾;

所述固体基质为麸皮、黄豆粉和玉米粉,麸皮、黄豆粉和玉米粉的重量比为3:1:1。

7.根据权利要求4所述的固体复合菌剂的制备方法,其特征在于,所述菌株活化培养的温度为28℃,所述巨大芽孢杆菌NL‑7菌株、苏云金芽孢杆菌NL‑11菌株的活化培养时间为2~3天;所述嗜热一氧化碳链霉菌NL‑1菌株的活化培养时间为4~6天;

所述菌株种子液培养的培养条件为28℃,180r/min震荡培养2~3天;

所述菌株种子液在固体基质中培养的温度为28℃,时间为8~10天。