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专利号: 2018112317487
申请人: 浙江海洋大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白源二肽基肽酶-IV抑制肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将日本黄姑鱼鱼鳔预处理,然后用5wt%的乙酸结合胃蛋白酶提取胶原蛋白,离心干燥,得日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白;

(2)利用复合酶对步骤(1)得到的日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白进行酶解,得日本黄姑鱼鱼鳔胶原肽;

(3)将日本黄姑鱼鱼鳔胶原肽结合二肽基肽酶筛选试剂盒,即得日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白源二肽基肽酶-IV抑制肽。

2.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白源二肽基肽酶-IV抑制肽的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述预处理工艺为:(a)将鱼鳔排气后,冷冻干燥,粉碎至粒径为5~20μm,得鱼鳔冷冻粉;

(b)将步骤(a)得到的鱼鳔冷冻粉加入到0.05~0.5mol/L温控型碱性离子液体中,于不同温度条件下超声处理,离心、干燥,得去杂蛋白、脱脂后的鱼鳔粉。

3.根据权利要求2所述的一种日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白源二肽基肽酶-IV抑制肽的制备方法,其特征在于,所述温控型碱性离子液体为双N-(2-二乙氨基)乙基聚乙二醇双咪唑氢氧根盐。

4.根据权利要求2所述的一种日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白源二肽基肽酶-IV抑制肽的制备方法,其特征在于,所述不同温度条件下超声处理的工艺为:先在20~25℃温度下,超声功率密度0.2~0.35w/cm2,超声处理10~20min;然后在10~15℃温度下,超声功率密度0.7~1.5w/cm2,超声处理5~8min;最后在然后在4~8℃温度下,超声功率密度2~2.5w/cm2,超声处理1~3min。

5.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白源二肽基肽酶-IV抑制肽的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述复合酶为pH响应凝胶因子改性微生物蛋白酶。

6.根据权利要求5所述的一种日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白源二肽基肽酶-IV抑制肽的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述酶解工艺为:加酶量为反应物质量的0.05~0.1%;先调节pH值为2.5以下,搅拌反应1~2h;再调节pH值为6.5~8.0,搅拌反应0.5~1h;反应结束后80~100℃灭活5~25min;再将上述反应液3000~5000rpm离心5~10min,收集上清,冷冻干燥得到日本黄姑鱼鱼鳔胶原肽。