1.一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
(1)将冷冻的金枪鱼鱼卵取出后解冻、匀浆后冷冻干燥,得到金枪鱼鱼卵粉;
(2)将所述金枪鱼鱼卵粉经无水乙醇脱脂后过滤晾干,得到脱脂金枪鱼鱼卵粉;
(3)将所述脱脂金枪鱼鱼卵粉经去离子水于超声波辅助下提取、离心、浓缩,获得浓缩液;
(4)将所述浓缩液经葡聚糖凝胶G-50柱分离后减压浓缩,得到金枪鱼鱼卵唾液酸糖肽粗品;
(5)将所述金枪鱼鱼卵唾液酸糖肽粗品利用活性炭吸附,经甲醇-水体系进行洗脱,得金枪鱼鱼卵唾液酸糖肽纯品。
2.根据权利要求1所述的一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于:步骤(1)中所述解冻的温度为4℃,所述冷冻的温度为-20℃,时间为12h。
3.根据权利要求1所述的一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于,步骤(2)中所述将所述金枪鱼鱼卵粉经无水乙醇脱脂后过滤晾干,得到脱脂金枪鱼鱼卵粉包括:将所述金枪鱼鱼卵粉加入10-15倍体积的无水乙醇中搅拌10h进行脱脂,期间每3h更换一次无水乙醇,脱脂后通过双层滤脂过滤除去乙醇,取滤渣于冷风干燥机中风干6-10h得到脱脂金枪鱼鱼卵粉。
4.根据权利要求1所述的一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于,步骤(3)中所述将所述脱脂金枪鱼鱼卵粉经去离子水于超声波辅助下提取、离心、浓缩,获得浓缩液包括:将所述脱脂金枪鱼鱼卵粉按其重量体积比的20-30倍加入去离子水中进行唾液酸糖肽的提取,在提取期间每小时进行超声波处理以辅助获取唾液酸糖肽,在获取结束后进行离心,取上清液在40-45℃下进行减压浓缩,获得浓缩液。
5.根据权利要求4所述的一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于:所述提取温度为4-10℃,提取时间为12-16h,所述超声波处理时间为10-30min,超声声场强度为
200~300W/cm2,超声频率为30kHz,离心转速为8000r/min,离心时间为10-15min。
6.根据权利要求1所述的一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于,步骤(4)中所述将所述浓缩液经葡聚糖凝胶G-50柱分离后减压浓缩,得到金枪鱼鱼卵唾液酸糖肽粗品包括:将所述浓缩液经葡聚糖凝胶G-50柱进行分离,温度为20-30℃,流速为1.0-
1.5ml/min,每7min收集洗脱液,用高效液相色谱法判断洗脱液中的唾液酸糖肽是否流脱,收集含有唾液酸糖肽的洗脱液在40-45℃下进行减压浓缩,冷冻干燥,得到金枪鱼鱼卵唾液酸糖肽粗品。
7.根据权利要求1所述的一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于,步骤(5)中所述活性炭吸附为:将所述金枪鱼鱼卵唾液酸糖肽粗品配成浓度为100-150mg/ml的溶液,加入适量活性炭吸附唾液酸糖肽。
8.根据权利要求7所述的一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于:所述活性炭的用量为10mg/ml,吸附时间为60-120min。
9.根据权利要求1所述的一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于,步骤(5)中所述甲醇-水体系进行洗脱为:用质量分数为4-6%的NaCl-甲醇溶液分三次洗脱活性炭中的唾液酸糖肽,收集洗脱液,经分子截留量为200Da的透析袋透析后,减压浓缩后冻干,得金枪鱼鱼卵唾液酸糖肽纯品。
10.根据权利要求9所述的一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于:所述甲醇的体积分数为5-8%。