1.一种汞离子检测方法,包括如下步骤:
(1)血红素-氧化石墨烯复合物的合成,采用现有技术合成H-GNs,上述血红素-氧化石墨烯复合物简称H-GNs;
(2)将核酸分子发卡序列5’-CACCACAAATTCTCTCTrAGGACAAAAAAAGT GGTG-3’加热到90℃保持5分钟,然后冷却2小时至室温形成核酸分子发卡结构;
(3)DNA酶的形成,在10mM Tris-HCl(pH 7.5)缓冲中将购得的50nM碎片DNA酶序列1和碎片DNA酶序列2与Hg2+的待测液和200nM步骤(2)所得核酸分子发卡混合反应,形成DNA酶结构,上述碎片DNA酶序列1为5’-TTTTGTCAGCGATCCGGAATTGTGGTTGGTGCGGCACCCATGTGAG AGAA-3’,上述碎片DNA酶序列2为5’-TTTTGTCAGCGATCCGGAACTCCTTCCTCTTCGGCACCCATGTGAG AGAA-3’;
(4)核酸分子发卡环的剪切,将步骤(3)所得溶液和10mM Mg2+溶液混合反应15分钟;
(5)H-GNs催化剂的形成,用Tris-HCl溶液稀释混合步骤(1)所得H-GNs和步骤(4),温育并加入适量NaCl,离心取上清液,该上清液即H-GNs催化剂;
(6)显色和测定,将步骤(5)所得H-GNs催化剂用于催化含3,3',5,5'-四甲基联苯胺和H2O2的Tris-HCl缓冲溶液的显色反应,测定其UV-vis吸收光谱,并用标准曲线法计算Hg2+浓度,上述3,3',5,5'-四甲基联苯胺简称TMB。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于步骤(1)具体为:将20mL含有10mg氧化石墨烯(GO)的水超声处理1小时,然后,将20mL的0.5mg mL-1血红素溶液与上述氧化石墨烯分散体混合并摇动几分钟,然后依次加入200μL氨水溶液和30μL水合肼,在60℃下搅拌3.5小时,离心30分钟,沉淀用超纯水冲洗数次。用超纯水稀释至0.3mg mL-1备用。
3.如前述权利要求之一所述的方法,其特征在于步骤(5)所用Tris-HCl溶液pH值为
7.5,步骤(6)所用Tris-HCl溶液pH值为5。
4.如前述权利要求之一所述的方法,其特征在于步骤(6)测定的UV-vis吸收光谱是500至800nm范围内的。