1.一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将黄姑鱼鱼鳞加入氢氧化钠溶液中,搅拌5-10h,取出后用水洗净;
2)将清洗后的黄姑鱼鱼鳞浸入盐酸溶液中浸泡脱钙20-40min,滤去酸液,向鱼鳞中加入鱼鳞重量10-20%的吸附剂搅拌混合均匀,静置吸附6-8h,用水洗净,干燥粉碎;
3)将干燥粉碎后的鱼鳞按质量比1:35-50加入水中,搅拌混合均匀,加入木瓜蛋白酶在
40-45℃下进行酶解10-15h,酶解完成后置于沸水中进行灭活5-10min,冷却至室温,以
12000-13000r/min转速进行离心25-30min,收集上清液;
4)将上清液依次进行超滤、纳滤浓缩处理,然后经过冷冻干燥,即得。
2.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中氢氧化钠的浓度为0.5-2wt%。
3.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中盐酸溶液的摩尔浓度为0.2-0.5mol/L,鱼鳞与盐酸的质量体积比为1:5-10 g/mL。
4.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法,其特征在于,所述步骤3)中木瓜蛋白酶的添加量为鱼鳞重量的3-6%。
5.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中吸附剂的制备方法包括以下步骤:将预处理蟹壳粉置于质量浓度为5-10%醋酸水溶液中浸泡2-5h,水洗至中性,烘干,将烘干后的蟹壳在惰性气体的吹扫下,先以3-4℃/min升温速率升温至300-350℃,焙烧30-
50min,然后以6-8℃/min升温速率升温至600-650℃,焙烧1-3h,得到多孔蟹壳粉;将多孔蟹壳粉加入高锰酸钾水溶液中进行活化20-40min,水洗后分离,干燥;将活化后的多孔蟹壳粉添加到海藻酸钠水溶液中,多孔蟹壳粉与海藻酸钠的质量比为1:0.4-0.6,然后加入三偏磷酸钠进行反应1-2h,三偏磷酸钠与海藻酸钠的质量比为1:3-6,经过分离、干燥得到吸附剂。
6.根据权利要求5所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法,其特征在于,所述高猛酸钾水溶液的浓度为0.5-2wt%。
7.根据权利要求5所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法,其特征在于,所述海藻酸钠水溶液的浓度为1-5wt%。
8.根据权利要求5所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法,其特征在于,所述预处理蟹壳粉的制备方法包括以下步骤:将蟹壳粉碎后得到蟹壳粉,将蟹壳粉与多巴胺按质量比1:0.25-0.5加入水中,蟹壳粉与水的质量体积比为1:30-40g/mL,升温至45-60℃,然后加入戊二醛,戊二醛与多巴胺的摩尔比为1:1-2,搅拌反应1-2h,搅拌速率控制在80-120r/min,经过过滤、水洗后将蟹壳粉在
50-70℃下干燥1-4h,得到预处理蟹壳粉。