欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13095918853 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13095918853
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2018115178306
申请人: 江南大学(如皋)食品生物技术研究所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一种固定化蔗糖磷酸化酶的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将产蔗糖磷酸化酶的枯草芽孢杆菌经发酵培养,离心收集上清,制得蔗糖磷酸化酶粗酶液;

(2)以5 15g氨基化树脂LX‑1000EA或LX‑1000HA为固定化载体,加入35 45mL、0.1 M、 ~ ~

pH 8的PBS缓冲液,在25 28℃温度下,200 rpm震荡15 min后在室温静置0.5 1.5 h,用滤纸~ ~

过滤后加入45 55ml的2%戊二醛中,在25 28℃温度下,200 rpm震荡4 6 h,用蒸馏水洗3次,~ ~ ~

洗去残留戊二醛,过滤得到处理后的氨基化树脂LX‑1000EA和LX‑1000HA;

(3)称取1 g步骤(2)中处理过的氨基化树脂LX‑1000EA或LX‑1000HA,加入步骤(1)中得到的蔗糖磷酸化酶,加酶量为4 11 U/g,于25 28℃,100 rpm震荡固定4 24 h,得到LX‑~ ~ ~

1000EA固定化SPase和LX‑1000HA固定化SPase。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵培养是以枯草芽孢杆菌SPase/pBSMuL3为生产菌株,在LB培养基中35 40℃培养8 10h,然后转接至TB发酵培养基中25 35~ ~ ~

℃培养45 50h。

~

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述加酶量为4 U/g、6 U/g、7 U/g、9 U/g或11 U/g。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述固定时间为4 h、8 h、12 h、16 h、20 h或24 h。