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专利号: 2018115853429
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种来源于放射形土壤杆菌的卤醇脱卤酶突变体,由序列如SEQ ID NO:2所示的氨基酸经定点饱和突变而来,所述突变的位点为下列之一:(1)第81位;(2)第86位;(3)第94位。

2.如权利要求1所述的卤醇脱卤酶突变体,其特征在于所述突变体由序列如SEQ ID NO:2所示的氨基酸第81位异亮氨酸突变为色氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺或组氨酸而得。

3.如权利要求1所述的卤醇脱卤酶突变体,其特征在于所述突变体由序列如SEQ ID NO:2所示的氨基酸第86位苯丙氨酸突变为天冬酰胺或天冬氨酸而得。

4.如权利要求1所述的卤醇脱卤酶突变体,其特征在于所述突变体由序列如SEQ ID NO:2所示的氨基酸第94位缬氨酸突变为甘氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、精氨酸或天冬酰胺而得。

5.如权利要求1所述的卤醇脱卤酶突变体,其特征在于所述突变体氨基酸序列如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.8所示。

6.权利要求1所述的卤醇脱卤酶突变体在制备(S)-环氧氯丙烷中的应用。

7.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述应用为:以含卤醇脱卤酶突变体编码基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体或湿菌体经超声破碎后获得的上清液作为催化剂,以1,3-二氯-2-丙醇为底物,以pH 8.0的磷酸盐缓冲液为反应介质,在600rpm、37℃条件下进行反应,反应结束后,将反应分离纯化,获得(S)-手性环氧氯丙烷。

8.如权利要求5所述的应用,其特征在于卤醇脱卤酶突变体编码基因序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.7所示。

9.如权利要求5所述的应用,其特征在于催化剂的用量以湿菌体重量计为5~100g/L缓冲液,所述底物的初始浓度为5~200mM。