1.一种L-天冬氨酸-α-脱羧酶突变体,其特征在于所述L-天冬氨酸-α-脱羧酶突变体为下列之一:(1)SEQ ID NO.1所示氨基酸第469位的丝氨酸突变为脯氨酸;(2)SEQ ID NO.1所示氨基酸第98位的精氨酸突变为组氨酸、第305位赖氨酸突变为谷氨酸;(3)SEQ ID NO.1所示氨基酸第98位的精氨酸突变为组氨酸、第305位赖氨酸突变为谷氨酸、第451位的异亮氨酸突变为缬氨酸。
2.一种权利要求1所述L-天冬氨酸-α-脱羧酶突变体编码基因。
3.一种由权利要求2所述编码基因构建的工程菌。
4.一种权利要求1所述L-天冬氨酸-α-脱羧酶突变体在转化L-天冬氨酸生产β-丙氨酸中的应用,其特征在于所述的应用为:以含L-天冬氨酸-α-脱羧酶突变体基因的如权利要求
3所述的工程菌经诱导培养获得的湿菌体为催化剂,以L-天冬氨酸为底物,以pH7.0磷酸盐缓冲液为反应介质构成转化体系,在37℃、200rpm条件下进行转化反应,反应完全后,获得β-丙氨酸转化液,分离提取,获得β-丙氨酸。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述转化体系中,催化剂加入量以湿菌体重量计为1-10g/L,所述底物终浓度为50-100 g/L。
6.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述催化剂按如下方法制备:将含L-天冬氨酸-α-脱羧酶突变体基因的如权利要求3所述的工程菌接种于含100μg/mL卡那霉素的LB培养基中,37℃,200r/min振荡培养12h;获得种子液;将种子液以体积浓度2%接种量转接于含
100μg/mL卡那霉素的LB培养基中,在37℃,200r/min下培养至OD600在0.6-0.8,加入终浓度
0.2 mM异丙基硫代半乳糖苷,然后30℃,200r/min诱导表达培养12h,在4℃下10000 rpm离心10 min,收集菌体细胞。