1.一种牛皮文物的高灵敏度检测方法，其特征在于包括以下步骤：

A）将牛皮剪成小块，用碳酸钠水溶液于恒温箱中浸泡脱脂；取出经脱脂后的牛皮，脱脂后以每1g牛皮与14-16 mL质量分数4-6%氯化钠水溶液混合，室温缓慢搅拌10-15 h除去盐溶性非胶原成分，最后用蒸馏水洗净沥干；

B）将沥干后的牛皮置于容器中，按2000-4000 U/g牛皮的量加入胃蛋白酶，然后按1g牛皮加入28-32 mL的0.4-0.6 mol/L乙酸，于35-39 ℃恒温箱中进行酶解反应7-9 h；酶解结束后，过滤，收集滤液，加入氯化钠盐析，氯化钠浓度为3-5 mol/L，盐析后于离心处理，沉淀以0.4-0.6 mol/L的乙酸溶解装入截留量为10000的透析袋中透析；最后取透析袋中的胶原蛋白溶液，冷冻干燥，研磨，得到牛胶原蛋白，备用；

C）取一根玻碳电极，将去除污渍的玻碳电极在麂皮上依次在1.0μm、0.3μm、0.05 μm的氧化铝悬浮液中进行8字形打磨；接下来依次在无水乙醇和蒸馏水中超声洗涤；

D）将洗净的玻碳电极浸泡在0.4-0.6M的稀硫酸溶液中，在电化学工作站上利用循环伏安法循环活化35-45周，循环伏安法的扫描范围为-0.4V-1.6V,扫描速率为0.08-0.12V/s；

E）配制得到pH7.4的PBS溶液，称取 K3[Fe(CN)6]、K4[Fe(CN)6]、KCl，加入pH7.4的PBS溶液，得到[Fe(CN)6]3-/4-浓度为4.5-5.5 mM的铁氰化钾溶液；

F）分别配制十六烷基三甲基溴化铵溶液、HAuCl4溶液和NaBH4溶液；将十六烷基三甲基溴化铵溶液添加于离心管中，在震荡作用下向其中加入HAuCl4溶液；再在震荡作用下，快速加入NaBH4溶液，剧烈震荡，静置，得到金纳米颗粒溶液；

G）按体积比50-70:80-100:8-12将0.15-0.25 mg/mL的聚丙烯酸溶液、1.5-2.5 mol/L的氨水和水混合，超声震荡，然后加入异丙醇，搅拌均匀，静置后1-5℃保存；

H）按体积比5-7：8-12：8-12将步骤G）所得溶液、水和异丙醇混合，随后加入多巴胺溶液，静置，得到中空结构的聚丙烯酸-多巴胺复合物溶液；

I）称取质量比为110-130：70-90的聚甲基丙烯酸甲酯和马来酸酐/1-十八碳烯交替共聚物，加入三氯甲烷和十二烷基磺酸钠溶液，所得混合液超声震荡，离心，除去上清液，剩余产物用水洗涤多次，得到球形纳米珠，最后加入三氯甲烷中制得溶液，备用；

J）取步骤D）处理后的玻碳电极，滴加35-45 μL步骤F）中所得金纳米颗粒溶液于玻碳电极表面，室温干燥后，将电极浸泡在0.2-0.3M的巯基丙酸中5-7h，然后彻底洗涤，将玻碳电极在NHS/EDC溶液中浸泡0.5-1.5h；然后将玻碳电极洗涤后在其表面滴加25-35 μL步骤H）所得溶液，室温干燥后洗涤，将玻碳电极在NHS/EDC溶液中浸泡20-40min；彻底洗涤后在玻碳电极表面继续滴加25-35μL步骤I）所得溶液，室温干燥，在NHS/EDC溶液中浸泡20-40min；

最后在玻碳电极表面滴加8-12 μL兔抗牛胶原蛋白多克隆抗体，35-39℃孵育0.5-1.5h；

K）用步骤B）中所得的牛胶原蛋白配制不同浓度的溶液，滴加15-25 μL于步骤J）处理完的玻碳电极表面，35-39℃孵育0.5-1.5h，洗涤后在电化学工作站上用差分脉冲伏安法扫描测试，扫描范围为-0.2V-0.6V；

L）称取文物样，用步骤B）中所述乙酸溶解，滴加15-25 μL于步骤J）处理完的玻碳电极表面，35-39℃孵育0.5-1.5h，洗涤后在电化学工作站上用差分脉冲伏安法扫描测试，扫描范围为-0.2V-0.6V。

2.如权利要求1所述的一种牛皮文物的高灵敏度检测方法，其特征在于，步骤A）中，将牛皮剪成1-3cm×1-3cm的小块，所述碳酸钠水溶液的质量浓度为5-7%，脱脂温度为45-55℃，脱脂时间为3-5h。

3.如权利要求1所述的一种牛皮文物的高灵敏度检测方法，其特征在于，步骤B）中，所述氯化钠浓度为3-5 mol/L，离心速率为10000-14000 r/min，离心时间8-12 min，透析2-4天。

4.如权利要求1所述的一种牛皮文物的高灵敏度检测方法，其特征在于，步骤C）中，玻碳电极的直径为2-4mm，打磨时间为8-12min；超声洗涤时间为8-12min。

5.如权利要求1所述的一种牛皮文物的高灵敏度检测方法，其特征在于，步骤F）的具体过程为：取3.6445 g十六烷基三甲基溴化铵于锥形瓶中，加入100 mL水，在35-39℃水浴中搅拌溶解；取2.057mL、10 g/L的HAuCl4于离心管中，加入2.942 mL的水摇匀，遮光保存；按NaBH4与冻水的比例为11.4 mg:30 mL配制0.5-0.7 mL NaBH4溶液；过滤得到8-12 mL十六烷基三甲基溴化铵溶液于离心管中，在震荡作用下向其中加入0.2-0.3 mL的HAuCl4溶液；再在震荡作用下，快速加入0.5-0.7 mL的NaBH4溶液，剧烈震荡1-3 min，20-30℃下静置1.5-

2.5 h，得到金纳米颗粒溶液。

6.如权利要求1所述的一种牛皮文物的高灵敏度检测方法，其特征在于，步骤G）中，超声震荡时间为0.5-1.5h，搅拌时间为0.5-1.5h。

7.如权利要求1所述的一种牛皮文物的高灵敏度检测方法，其特征在于，步骤H）中，静置温度为45-55℃，静置时间为2-4h。

8.如权利要求1所述的一种牛皮文物的高灵敏度检测方法，其特征在于，步骤I）中，超声震荡时间为1-3 min，离心速率为8000-12000 rpm，离心时间为8-12min。

9.如权利要求1所述的一种牛皮文物的高灵敏度检测方法，其特征在于，步骤J）中，所述NHS/EDC溶液中NHS和EDC的摩尔比为0.2-0.4:0.4-0.6。

10.如权利要求1所述的一种牛皮文物的高灵敏度检测方法，其特征在于，步骤L）中，称取0.01-0.03 g文物样，用1-3 mL步骤B）中所述乙酸溶解。