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专利号: 2019100399813
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种腈水合酶突变体,其特征在于,含有PtNHase-α亚基、PtNHase-β亚基以及一个调控蛋白PtNHase-p,其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示。

2.编码权利要求1所述腈水合酶突变体的基因。

3.含有权利要求2所述基因的载体或细胞。

4.含权利要求1所述腈水合酶突变体的组合物。

5.一种重组大肠杆菌,其特征在于,表达权利要求1所述的腈水合酶突变体。

6.如权利要求5所述的重组大肠杆菌,其特征在于,以大肠杆菌BL21为宿主,以pET24a(+)为表达载体。

7.一种提高腈水合酶稳定性的方法,其特征在于,以α亚基、β亚基、调控蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.3所示的腈水合酶为亲本酶,将α亚基的第6位亮氨酸突变为苏氨酸、第19位丙氨酸突变为缬氨酸、第126位苯丙氨酸突变为酪氨酸,β亚基的第46位甲硫氨酸突变为赖氨酸、第47位甘氨酸突变为天冬氨酸、第108位谷氨酸突变为精氨酸、第212位丝氨酸突变为酪氨酸。

8.权利要求5或6所述重组大肠杆菌的构建方法,其特征在于,是将如SEQ ID NO.8所示的编码腈水合酶的基因与表达载体连接,转入大肠杆菌中。

9.权利要求1所述的腈水合酶突变体或表达权利要求1所述的腈水合酶突变体的细胞在生产含烟酰胺或丙烯酰胺的产品中的应用。

10.权利要求1所述的腈水合酶突变体或表达权利要求1所述的腈水合酶突变体的细胞在饲料、食品或制药领域内的应用。