1.一种山楂叶中多酚类物质的提取方法,其特征是,包括以下步骤:(1)将山楂叶样品粉碎成山楂叶粉末并过筛;
(2)将过筛后的山楂叶粉末在搅拌状态下加入水中,混合均匀后再加入碱性试剂搅拌均匀,形成混合液;
(3)在混合液中加入纤维素酶进行水解,然后再进行微波辅助提取;
所述纤维素酶为固定化纤维素酶,所述固定化纤维素酶的制备方法包括以下步骤:a)称取碳纳米管加入三甘醇中,分散均匀后在搅拌状态下加入与碳纳米管质量比为1:
1‑2:1的乙酰丙酮铁,200‑300℃下搅拌30‑60min;
b)冷却至室温后用乙醇稀释,并用磁铁将产物从溶液中分离,分离后的产物用乙醇反复清洗后50‑70℃下干燥1‑3h,即得磁性载体;
c)将磁性载体加入乙醇与水的体积比为1:1‑2:1的混合溶剂中,分散均匀后加入与磁性载体质量比为10:1‑20:1的3‑氨丙基三乙氧基硅烷,氮气保护下40‑50℃搅拌反应20‑
24h;
d)反应结束后用磁铁将产物从溶液中分离,分离后的产物用乙醇反复清洗后50‑70℃下干燥1‑3h,即得表面修饰的磁性载体;
e)将表面修饰的磁性载体加入pH为7.0‑8.0的磷酸缓冲溶液中,分散均匀后加入占体系总质量1%‑2%的戊二醛,室温下搅拌反应30‑60min,反应结束后用磁铁将产物从溶液中分离,分离后的产物用磷酸缓冲溶液反复清洗,得到活化后的磁性载体;
f)将活化后的磁性载体加入pH为7.0‑8.0磷酸缓冲溶液中,分散均匀后加入纤维素酶溶液,震荡反应1‑3h;
g)用磁铁将产物从溶液中分离,分离后的产物用磷酸缓冲溶液反复清洗,50‑70℃下干燥1‑3h,即得固定化纤维素酶;
(4)微波辅助提取后进行离心分离,取上清液;
(5)在上清液中加入盐酸将上清液调节至酸性,静置后过滤;
(6)用水反复清洗过滤后的产物,干燥后即得多酚类物质。
2.根据权利要求1所述的一种山楂叶中多酚类物质的提取方法,其特征是,步骤(1)中将山楂叶粉末过100‑200目筛。
3.根据权利要求1所述的一种山楂叶中多酚类物质的提取方法,其特征是,步骤(2)中的碱性试剂包括硼酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸氢二钠、氢氧化钠、乙酸钠中的至少一种。
4.根据权利要求1或3所述的一种山楂叶中多酚类物质的提取方法,其特征是,步骤(2)中山楂叶粉末和碱性试剂的质量比为1:1‑10:1。
5.根据权利要求1所述的一种山楂叶中多酚类物质的提取方法,其特征是,步骤(3)中微波辅助提取温度为30‑60℃,时间为5‑20min。
6.根据权利要求1所述的一种山楂叶中多酚类物质的提取方法,其特征是,步骤(4)中离心速度为3000‑4000 rpm。
7.根据权利要求1所述的一种山楂叶中多酚类物质的提取方法,其特征是,步骤(5)中加入盐酸调节后,上清液的pH为3.0‑6.0。
8.根据权利要求1所述的一种山楂叶中多酚类物质的提取方法,其特征是,步骤(6)中干燥时的温度为50‑70℃。