1.一种谷胱甘肽巯基转移酶荧光分子探针的制备方法，其特征在于：采用以下步骤：（1）将2,3,3-三甲基-3H-苯并吲哚和碘乙烷溶解在无水乙腈中，得到产物1；

（2）将无水N，N-二甲基甲酰胺和无水二氯甲烷混合，将三氯氧磷与无水二氯甲烷一起匀速滴加到上述溶液中，将环己酮加入混合物中，然后升温至45℃保持3小时，然后反应物倒入冰中，静置，过滤并收集过滤物；

（3）将产物1和产物2溶解在正丁醇和苯的混合溶液中，反应，纯化，得到产物3；

（4）将产物3，甲胺盐酸盐和三乙胺溶解在无水N，N-二甲基甲酰胺中，加热搅拌，将反应粗产物纯化，得到产物4；

（5）将3,4-二硝基苯甲酸、三光气溶于无水二氯甲烷中，混合，然后加入N，N-二异丙基乙胺，反应，除去溶剂后，将得到的残余物溶于无水二氯甲烷中，并加入N，N-二异丙基乙胺和4-二甲氨基吡啶，将产物4溶解在二氯甲烷溶液中并加入上述混合物，搅拌直至原料耗尽，得到的固体粗产物纯化，即得谷胱甘肽巯基转移酶检测荧光分子探针。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，采用的具体步骤为：

（1）将2,3,3-三甲基-3H-苯并吲哚和碘乙烷75mmol溶解在40 mL无水乙腈中，将混合物回流反应12小时，冷却至室温后过滤，用乙醚洗涤过滤沉淀物并真空干燥，得到产物1；

（2）将40 mL无水N，N-二甲基甲酰胺和40 mL无水二氯甲烷混合，冷却至-10℃，搅拌20分钟，然后将37mL三氯氧磷与35 mL无水二氯甲烷一起匀速滴加到上述溶液中，再将52.6 mmol环己酮加入混合物中，直至溶液从无色变为黄色，然后将溶液加热至45℃保持3小时，然后反应物倒入冰中，并静置12小时，收集过滤物并真空干燥，得产物2；

（3）将2 mmol产物1和1mmol产物2溶解在100 mL正丁醇和苯的混合溶液中，回流3小时，然后真空干燥，得到绿色粗产物，将粗产物通过硅胶柱纯化，得到产物3，其中所述的正丁醇和苯的体积比为7：3；

（4）将2 mmol产物3，20 mmol 甲胺盐酸盐和20 mmol三乙胺溶解在50 mL无水N，N-二甲基甲酰胺中，将混合物在40℃下搅拌24小时，将粗产物用200-300目硅胶柱纯化，得到产物

4；

（5）将1 mmol 3,4-二硝基苯甲酸，3 mmol三光气溶于100 mL无水二氯甲烷中，将混合物在0℃混合，然后加入1 mL N，N-二异丙基乙胺，反应30分钟，真空除去溶剂后，将得到的残余物溶于50 mL无水二氯甲烷中，并加入1mL N，N-二异丙基乙胺和20 mg 4-二甲氨基吡啶，将0.2mmol产物4溶解在10 mL二氯甲烷溶液中并加入上述混合物，然后将混合物在25℃下搅拌至原料完全耗尽，获得的固体粗产物通过200-300目的硅胶柱纯化，即得谷胱甘肽巯基转移酶检测荧光分子探针。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述谷胱甘肽巯基转移酶检测荧光分子探针效果判断指标如下：检测灵敏度：检测限10 ng/mL；

检测响应倍率：检测时荧光增强，荧光强度为5×104 -3×105；

检测速度：0-10分钟；

光学机理指标：PET 机理的谷胱甘肽巯基转移酶荧光探针。

4.一种权利要求1-4任一项所述的制备方法制备的谷胱甘肽巯基转移酶检测荧光分子探针的应用，其特征在于：适用于中谷胱甘肽巯基转移酶的定性分析。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：定量分析标准品中谷胱甘肽巯基转移酶含量的方法，步骤包括：

1）配制溶液

探针储备液：称取谷胱甘肽巯基转移酶检测荧光分子探针溶于无水DMSO，配制浓度100μM的探针储备液；

谷胱甘肽巯基转移酶储备液：称取待测目标物1 mg谷胱甘肽巯基转移酶溶于10 ml蒸馏水中，配制为浓度100μg/mL的谷胱甘肽巯基转移酶储备液；

2）建立谷胱甘肽巯基转移酶标准品的线性方程

将步骤1）配制的谷胱甘肽巯基转移酶储备液用蒸馏水稀释得到梯度浓度为0～1.1μg/mL的谷胱甘肽巯基转移酶标准溶液，然后分别取不同浓度谷胱甘肽巯基转移酶标准溶液与

10μM步骤1）配制的探针溶液和0.1 mM GSH溶液混合后，加入50 μL 浓度为10 mM、 pH 7.42的Tris-盐酸缓冲液，振荡，使体系混合均匀，在25℃下放置50 min，然后经荧光分光光度计检测，建立谷胱甘肽巯基转移酶浓度与荧光信号强度的线性方程。