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专利号: 2019101606670
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种使用转化菌株催化合成米格列醇中间体的方法,所述转化菌株命名为氧化葡糖杆菌(Gluconobacter oxydans),株号pBBR‑sldAB,保藏号为CCTCC No. M 2019033,所述的方法,包括以下步骤:

(1)将所述转化菌株发酵产酶,并收集发酵后的菌体获得静息细胞;

(2)使用步骤(1)制备的静息细胞催化底物N‑羟乙基葡萄糖胺获得产物米格列醇中间体:6‑脱氧‑6氨基(N‑羟乙基)‑α‑L‑呋喃山梨糖,步骤(1)中静息细胞的制备方法包括以下步骤:将所述转化菌株接种到培养基中进行发酵培养,然后收集菌体获得所述静息细胞,其中,所述培养基包括:D‑山梨醇50 g/L,酵母浸出粉25 g/L,KH2PO4 5 g/L,K2HPO4 5 g/L,溶剂为水,所述培养基还包括谷氨酸钠、异亮氨酸、丝氨酸和精氨酸,谷氨酸钠2g/L,异亮氨酸、丝氨酸和精氨酸各1 g/L。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中催化反应使用体系组成为:底物N‑羟乙基葡萄糖胺60~120 g/L,步骤(1)制备的静息细胞以湿菌体重量计40 80 g/L,其余为~

水。

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(2)中催化反应使用体系组成为:底物N‑羟乙基葡萄糖胺100 g/L,七水硫酸镁5 g/L,步骤(1)制备的静息细胞以湿菌体重量计60 g/L,其余为水,调节pH为5.0。