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专利号: 201910163211X
申请人: 衡阳师范学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种分段补料发酵生产鲜味肽的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)菌种活化:将鲜味肽生产菌株接种至LB固体培养基上,在37℃条件下活化培养8~

10h;

(2)摇瓶培养:取活化后的鲜味肽生产菌株接种至LB液体培养基中,在200rpm、37℃条件下培养至OD600=0.6,之后按0.05%~0.2%的接种量转入LB液体培养基中,在200rpm、37℃条件下摇瓶培养8h作为种子培养液备用;

(3)分段补料发酵:将种子培养液接种至基础发酵培养基中进行培养,当基础培养基中碳源浓度在5g/L以下时启动指数补料控制,进行指数流加补料,自诱导生产鲜味肽;指数流加的补料速度如(1)式所示:式中F表示补料流加速率;μ表示菌体比生长速率,并且μ分段;X0表示开始补料时发酵罐内的菌体浓度;V0表示开始补料时发酵罐内的培养基体积;SF表示补料培养基中的底物葡萄糖浓度;YX/S菌体生长基于底物的得率系数,t表示补料时间。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中所述鲜味肽包括氨基酸序列为Ser-Ser-Arg-Asp-Glu-Gln-Ser-Arg的多肽。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述鲜味肽的表达菌为枯草芽孢杆菌,表达载体为pMA09srfA,启动子为具有自诱导特性的srfA启动子。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)中μ值分段包括4个阶段,时间从补料开始时计算,分别为0~4h、4~8h、8~14h、14~20h,各阶段的μ值分别为0.45~0.5、0.25~0.35、0.15~0.2、0~0.1。