1.羧基化氧化石墨烯修饰电极检测miRNA-21的方法，其特征在于，包括：步骤一、电极修饰：a、将浓度为2μM的miRNA-21适配体溶液滴加到金电极表面，置于4℃环境中12h后，用PH为7.4的PBS溶液冲洗25s，用超纯水冲洗干净，用氮气吹干；

b、将浓度为1mM的巯基乙醇溶液滴加到步骤a中的金电极表面，直至金电极表面布满巯基乙醇溶液，置于4℃环境中1h后，用PH为7.4的PBS溶液冲洗25s，用超纯水冲洗干净，用氮气吹干；

c、将反应液滴加到步骤b中的金电极表面，置于55℃环境中125min后，用PH为7.4的PBS溶液冲洗25s，用超纯水冲洗干净，用氮气吹干，其中，反应液为10mM Tris-HCl，反应液中还含有0.1M的NaCl、1.0mM的MgCl2，0.05U的双链特异性核酸酶；

d、将步骤c中的金电极表面浸泡于羧基化氧化石墨烯复合物饱和溶液中，于80℃下静置6h，再用PH为7.4的PBS溶液冲洗25s，用超纯水冲洗干净，再用氮气吹干；

其中，羧基化氧化石墨烯复合物饱和溶液的制备方法为：将二茂铁和二苯丙氨酸溶于乙醇，使二茂铁和二苯丙氨酸的浓度分别为2mM和1mM，再加入羧基化氧化石墨烯，于超声频率为100KHz超声处理50min，加入颗粒粒径小于25μm的二氧化硅，继续于超声频率为100KHz超声处理30min，过滤取滤液，将滤液置于25℃条件下挥发去除溶剂，得到羧基化氧化石墨烯复合物，将羧基化氧化石墨烯复合物置于超纯水中，于超声频率为100KHz超声处理

10min，得到羧基化氧化石墨烯复合物饱和溶液；

e、将浓度为1mM的亚甲基蓝滴加到步骤d中的金电极表面，置于4℃环境中100min后，用PH为7.4的PBS溶液冲洗25s，再用超纯水冲洗干净，然后用氮气吹干，得到修饰电极；

步骤二、重复步骤一制备多个修饰电极，其中，制备多个修饰电极的反应液中还含有miRNA-21溶液，且miRNA-21溶液的miRNA-21的浓度不同；

步骤三、以银氯化银电极和铂电极分别为参比电极和对电极，以步骤二制备的修饰电极为工作电极，搭建多个三电极体系，采用交流阻抗法扫描得到多个交流阻抗曲线图，根据交流阻抗曲线图拟合得到每个浓度的miRNA-21溶液对应的阻抗值；

步骤四、以浓度不为0的miRNA-21溶液的阻抗值减去浓度为0的miRNA-21溶液的阻抗值的差值为纵坐标，以miRNA-21溶液的浓度为横坐标，计算得到miRNA-21溶液阻抗值的差值与浓度的线性关系；

步骤五、按照步骤一制备一个修饰电极，其中，制备该修饰电极中的反应液中加入有10μL含有未知浓度的miRNA-21的待测样液；

步骤六、以银氯化银电极和铂电极分别为参比电极和对电极，以步骤五中的修饰电极为工作电极，搭建三电极体系，采用交流阻抗法扫描得到一个交流阻抗曲线图，根据交流阻抗曲线图拟合得到待测样液对应的阻抗值，以该阻抗值减去浓度为0的miRNA-21溶液的阻抗值，得到差值，将该差值代入步骤五中的线性关系，计算得到待测样液中miRNA-21的浓度；

羧基化氧化石墨烯的制备方法为：将氧化石墨分散于超纯水中，超声处理分散形成均匀的黄色透明胶体溶液，即得氧化石墨烯，然后加入NaOH和一氯乙酸超声处理，使氧化石墨烯上的羟基和环氧基转化为羧基，然后热过滤除去杂质离子，蒸发掉多余水分，再在65℃下真空干燥得到羧基化氧化石墨烯，其中，氧化石墨、超纯水、NaOH、一氯乙酸的质量体积比为

100mg:100mL:6.0g:5.0g。

2.如权利要求1所述的羧基化氧化石墨烯修饰电极检测miRNA-21的方法，其特征在于，还包括：在步骤一之前，对金电极进行以下处理：将金电极置于NaHCO3浓度为5μM、KCl浓度为10μM的超纯水溶液中，于温度为65℃水浴条件下浸泡40min，用超纯水冲洗后，再置于乙酸浓度为5μM、硅酸浓度为2μM的超纯水溶液中，于温度为80℃水浴条件下浸泡60min，用超纯水冲洗后，在抛光布上用0.05μm的抛光粉打磨，再用超纯水冲洗干净。

3.如权利要求1所述的羧基化氧化石墨烯修饰电极检测miRNA-21的方法，其特征在于，miRNA-21的核苷酸序列为：5'-UAGCUUAUCAGACUGAUGUUGA-3'；

miRNA-21适配体的核苷酸序列为5'-TCAACATCAGTCTGATAAGCTATTT-(CH2)6-SH-3'。

4.如权利要求1所述的羧基化氧化石墨烯修饰电极检测miRNA-21的方法，其特征在于，步骤二中的miRNA-21溶液的浓度分别为0mol/L、2×10-12mol/L、5×10-12mol/L、1×10-

11 -11

mol/L、2×10 mol/L，向反应液中加入的miRNA-21溶液的体积为10μL，反应液的总体积为

20μL。

5.如权利要求1所述的羧基化氧化石墨烯修饰电极检测miRNA-21的方法，其特征在于，步骤三和步骤六中扫描参数设置为：振幅为0.005V，频率为0.1～1000Hz的条件下，在反应

3- 4- 3- 4-

介质液为含有[Fe(CN)6] 和Fe(CN)6 的溶液中进行检测，其中，[Fe(CN)6] 和Fe(CN)6 的总浓度为5mmol。