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专利号: 2019101913664
申请人: 重庆工商大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-02-26
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种溶液中汞离子浓度的检测方法,包括如下步骤:

(1)在待测溶液中加入适量DNA复合物、序列T和燃料链F,所述序列T为:5’‑TTCATTGTGTTACTTT_TCTCCA‑3’;所述DNA复合物由序列R、序列Q和序列P杂交形成,其中序列R为5’‑GGGTTGGGCGGGATGGGTTTCAC‑3’,序列Q为5’‑TGGAGA_TTTGTTTCTCTTTGTT_AGGG_GTGAAACCCATCCCGCCCAACCC‑3’,序列P为5’‑CCACATACATCATATT_CCCT_AACAAAGAGAAACAAA‑

3’;所述燃料链F为5’‑GGGTTGGGCGGGATGGGTTTCAC_CCCT_AACAAAGAGAAACAAA‑3’;

(2)将步骤(1)所得溶液加入含有适量MgCl2的Tris‑HCl缓冲溶液中孵育;

(3)在步骤(2)所得溶液中加入适量氯化血红素和适量KCl;

(4)将步骤(3)所得溶液加入含有适量3,3',5,5'‑四甲基联苯胺和H2O2的Tris‑HCl溶液中;

(5)测定其UV‑vis吸收光谱,并用标准曲线法计算溶液中汞离子浓度。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述DNA复合物形成步骤如下:将50nM序列P,

50nM序列R和50nM序列Q混合在一起并在pH值为8的10mM Tris‑HCl溶液中加热至90℃持续5分钟,然后将其缓慢冷却以形成DNA复合物。

3.如前述权利要求之一所述的方法,其特征在于步骤(1)中加入的DNA复合物、序列T和燃料链F分别为50nM、100nM和100nM。

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于步骤(2)具体为将步骤(1)所得溶液加入pH值为7.5的含有5mM MgCl2的10mM Tris‑HCl缓冲溶液中在37℃下孵育120分钟。

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于步骤(3)中加入的氯化血红素和KCl分别为

30nM和25mM。

6.如权利要求5所述的方法,其特征在于步骤(4)具体为:将步骤(4)所得溶液加入含有

600μM的3,3',5,5'‑四甲基联苯胺和10mM H2O 2的pH值为5.5的Tris‑HCl溶液中。