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专利号: 201910199413X
申请人: 常熟理工学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-09-12
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种GDSL脂肪酶,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.编码权利要求1所述GDSL脂肪酶的基因。

3.根据权利要求2所述的基因,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.一种包含权利要求3所述基因的重组载体。

5.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于,表达载体为pET 32a(+)。

6.一种包含权利要求5所述的重组载体的工程菌。

7.根据权利要求6所述的工程菌,其特征在于,宿主细胞为大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。

8.权利要求6或7任一项所述的工程菌在生产维生素A棕榈酸酯中的应用,包括:(1)将工程菌接入LB培养基中进行种子培养;

(2)种子液转入发酵培养基中进行发酵培养,之后加入诱导剂诱导酶类的表达;

(3)对发酵液进行离心,获取上清液,通过硫酸铵沉淀、冷冻干燥获得酶粉;

(4)将酶粉添加至含有维生素A和棕榈酸的有机相体系,生产维生素A棕榈酸酯。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述发酵培养基成分为:胰蛋白胨10g/L,酵母粉5g/L,NaCl 10g/L,MgSO4·7H2O 1g/L,KH2PO4 0.5g/L,K2HPO40.5g/L,橄榄油乳化液12mL/L,蒸馏水定容至1L。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述橄榄油乳化液配制方法为:将橄榄油乳化剂PVA与橄榄油以体积比3:1混合,利用超声波乳化。